AGENTS DÉCOLORANTS. 379 



colorent très rapidement dans les bains ordinaires, perdent tout aussi 

 vite leurs nuances traitées par des agents décolorants, et, inversement, 

 lorsque l'action du bain adù être prolongée, la coloration obtenue résiste 

 beaucoup plus. On ne connaît pas encore les causes de ces particula- 

 rités; on pense que la résistance à la décoloration, si remarquable chez 

 certaines espèces, est due à la présence dans la membrane ou le proto- 

 plasma de substances particulières formant avec les couleursdes compo- 

 sés très stables. Ce serait une matière grasse ou cireuse, des acides gras, 

 pour certaines espèces (1), du tannin (2) ou des corps voisins pour 

 d'autres. 



Les agents décolorants les plus usités sont, par ordre d'importance, 

 l'alcool, les acides, les alcalis et certains réactifs neutres. 



1° Décoloration par i alcool. 



L'alcool est certainement celui qui servira le plus. On emploie l'alcool 

 à 95° ou, mieux, l'alcool absolu. La rapidité de la décoloration est très 

 variable; parfois la lamelle doit être simplement plongée dans l'alcool, 

 puis retirée immédiatement et lavée à grande eau pour arrêter de suite 

 l'action du réactif, ou bien elle doit y séjourner pendant un temps assez 

 long, parfois un jour et plus, pour que l'effet voulu soit produit. Lorsque 

 la décoloration est rapide, il est préférable d'user d'alcool dilué, pour 

 pouvoir mieux graduer l'emploi du réactif. 



On peut renforcer la puissance décolorante de l'alcool en lui ajoutant 

 2 p. ICO de fluorescéine jaune acide (Kùhne) ou 0,25 p. 100 de vert 

 lumière [Lichtgrûn FS) (Benda). 



Méthode de Gram. — L'alcool, après action de l'iode, a été préco- 

 nisé par Gram (3) ; cette technique est très connue sous le nom de 

 Méthode de Gram. L'iode sert de mordant, de fixatif ou de modificateur 

 pour le colorant en formant avec lui un composé qui jouit d'une élection 

 pour certaines Bactéries et pas pour d'autres ; la décoloration vraie est 

 produite par l'action ultérieure de l'alcool. Voici la formule qu'il indique 

 pour user de ce réactif : 



Solution de Gram (ou encore : Solution de Lugol). 



Iode 1 gramme. 



Iodure de potassium 2 grammes. 



Eau distillée 300 — 



Les préparations, sorties du bain colorant, au mieux d'un bain au 

 violet de gentiane ou à la thionine, additionné ou non d'eau phéniquée, 

 sont, après lavage à l'eau, plongées dans cette solution jusqu'à ce 

 qu'elles prennent une teinte noirâtre, ce qui demande une à deux 

 minutes. Elles sont lavées à l'alcool à 95° ou, mieux, absolu, jusqu'à ce 

 que la teinte noire devienne gris pâle, ce qui s'obtient en quelques 



(1) Bienstock, Zur Frage der sog. Syphilisbacillen uud der Tuberkelbacillen-Farbung 

 (Fortschr. der Med., 1886, n° 6). — Gottstein, Die Beeinflussung des Fârbungsver- 

 haltens von Microorganismen durch Fette (Ibid., n° 8). Voy. aussi p. il. 



(2) Spina, Recherches sur la décoloration des Bactéries (Allgem. Wiener med. Zeit., 

 1887). 



(3) Gram, Ueber die isolirte Fiirbung der Schizomyceten in Schnitt und Trocken- 

 praeparaten {Fortschr. der Med., II, 1884, p. 185). 



