384 PRÉPARATIONS ET ÉTUDE MICROSCOPIQUES. 



2° Décoloration par les acides. 



Les acides minéraux sont des décolorants trop énergiques qui doivent 

 être réservés pour quelques cas spéciaux. De rares espèces, les Bacilles 

 de la tuberculose, de la lèpre, du smegma préputial, des Bacilles divers 

 dits pseudo-tuberculeux, par exemple, résistent seuls à leur action 

 (Saurefeste) et gardent leur couleur. D'où l'importance de cette méthode 

 de décoloration dans la recherche de ces espèces. 



Ehrlich(l) a annoncé, le premier, que le Bacille de la tuberculose 

 résistait à l'action de l'acide azotique au tiers (acide azotique ordinaire, 

 une partie; eau, deux parties). L'usage de ce décolorant est devenu 

 dès lors d'une pratique courante dans la recherche de cette espèce. 

 L'action doit toutefois être suivie de très près, car la résistance n'est 

 que relative ; si le contact est trop prolongé, toute coloration, même la 

 plus intense, ne tarde pas à disparaître. L'acide azotique forme, avec les 

 couleurs d'aniline, des composés incolores ; c'est la raison de la décolo- 

 ration qu'il provoque. Avant d'en arriver à ce dernier terme, il se pro- 

 duit des nuances verdâtres, puis jaunes. Il faut arrêter l'effet à l'appari- 

 tion du vert, ou tout au moins dès les premières nuances jaunes, par un 

 lavage immédiat. Sous l'influence de l'eau, une faible partie du colorant 

 se régénère, la préparation reparaît très légèrement teintée de la nuance 

 primitive. On peut, du reste, faire agir le réactif à plusieurs reprises, 

 jusqu'à ce que le résultat soit obtenu. 



Au lieu d'acide nitrique, on a employé l'acide sulfurique, l'acide 

 chlorhydrique dilués, l'acide sulfureux. 



Hauser ("2) préfère, comme décolorants, à l'acide nitrique, surtout 

 pour la recherche du Bacille de la tuberculose, les acides organiques, 

 acétique, tartrique, picrique, et, principalement, lactique. Dans les 

 solutions de 5 à 10 p. 100 d'eau, la décoloration se fait bien ; le Bacille 

 de la tuberculose résiste pendant longtemps , une demi-heure au 

 moins. 



3° Décoloration par d'autres réactifs. 



Koch a employé comme décolorant une solution de carbonate de 

 potasse, obtenne en mélangeant une solution saturée de ce sel avec un 

 même volume d'eau distillée. Malassez et Vignal (3) se sont servis de 

 carbonate de soude ainsi préparé : 



Solution aqueuse de carbonate de soude à 2 p. 100 2 volumes. 



Alcool absolu 1 volume. 



Le sublimé corrosif a donné à Gram de bons résultats, qu'il faut se 

 garder de confondre avec ceux obtenus à l'aide de sa solution iodée, 

 dont l'emploi doit seul être désigné sous le nom de méthode de Gram. 



(1) Ehrlich, Zeilschr. fur klin. Med., II, p. 307, et Berlin, klin. Wochenschr.. 

 6 mai 1882. 



(2) Hauser, Note sur la coloration du Bacille de la tuberculose {Soc. de Biol., 29 oc- 

 tobre 1898). 



(3) Malassez et Vignal, Sur le microorganisme de la tuberculose zoogléique (Arch. 

 de physiol., IV, 1884). 



