AGENTS DECOLORANTS. 



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Les préparations, surtout les coupes, bien lavées à l'eau distillée après 

 coloration, sont placées dans une solution de sublimé à 1 p. 100. On les 

 y laisse séjourner quelque temps et on les lave à l'eau distillée d'abord, 

 puis avec un peu d'alcool absolu. Le sublimé joue plutôt un rôle de 

 fixateur ; c'est l'alcool qui est le décolorant actif. 



La glycérine, les essences de girofle et de bergamote décolorent peu à 

 peu les Bactéries, mais leur action est trop lente et trop inégale pour 

 l'utiliser d'une façon courante. Il faut y songer cependant quand on a 

 à traiter des préparations par ces réactifs, comme éclaircissants ou 

 conservateurs. 



Le chlorhydrate d'aniline, en solution aqueuse à 2 p. 100, est un bon 

 agent décolorant, mais d'emploi un peu coûteux parce qu'il ne faut 

 employer que des solutions fraîches. 



Méthode de Claudius. — Claudius (1), après fixation à l'acide 

 picrique, emploie comme décolorant le chloroforme ou l'essence de 

 girofles. 



La lamelle, séchée et flambée, est colorée dans une solution aqueuse 

 de violet de méthyle (violet de méthyle 5B extra, Merck) à 1 p. 100, 

 pendant une minute, puis lavée à l'eau ; elle est ensuite soumise pen- 

 dant une minute à l'action d'une solution d'acide picrique dans l'eau 

 distillée, formée de 1 volume d'une solution saturée, plus 1 volume 

 d'eau, lavée et étanchée au papier-filtre ; on lave au chloroforme tant 

 qu'il y a décoloration (l'opération se fait économiquement dans une 

 petite fiole à large goulot, bouchée à l'émeri). Il est possible de rem- 

 placer le chloroforme par l'application successive de quelques gouttes 

 d'essence de girofles, jusqu'à décoloration complète. 



Voici, d'après Claudius, une liste d'espèces qui restent colorées par 

 cette méthode : 



Staphylocoque doré. 

 — blanc. 



Pneumocoque. 

 Bacille de la diphtérie. 



— du charbon. 



— du rouget du porc. 

 Bactérie du farcin du bœuf. 

 Télragène. 



Bacille du tétanos. 



Bacille de la lèpre. 



— de la tuberculose (prend mal la 



couleur). 

 Bacillus megaterium. 

 Bacille de la septicémie de la souris. 



— du charbon symptomalique. 

 Vibrion septique. 



Bacillus nekroseos dé Bank. 



Par contre, les espèces suivantes ne restent pas colorées 



Bacille typhique. 

 Colibacille. 

 Spirille du choléra. 



— de Melschnikoff. 

 Pneumobacille. 



Gonocoque. 

 Bacille du lait bleu. 

 — pyocyanique. 

 Micrococcus prodigiosus. 



Le même traitement peut être appliqué aux coupes, préalablement 

 collées sur lamelles ; il est préférable d'employer comme décolorant 

 l'essence de girofles, par gouttes successives enlevées avec du papier 

 buvard. Ce procédé est compatible avec une coloration préalable des 

 noyaux, par le carmin au lithium, par exemple. 



(1) Claurius, Méthode de coloration à la fois simple et contrastante des microbes 

 (Ann. de l'Fnst. Pasteur, XI, 1897, p. 332). 



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