380 PRÉPARATIONS ET ÉTL'DE MICROSCOPIQUES. 



Celte méthode de Claudius parait donner des résultats plus constants 

 que la véritable méthode de Gram. Le Vibrion septique, le Bacille du 

 charbon symptomatique, le Bacille diphtérique, entre autres, qui 

 prennent mal et irrégulièrement le Gram, donneraient toujours une 

 réaction positive par la méthode de Claudius. 



Méthode de Weigert. — Weigert (1) emploie V huile <r aniline 

 comme décolorant. Les préparations ou les coupes sont colorées à 

 chaud dans un bain de violet, puis soumises pendant trois ou quatre 

 minutes à l'action de la solution iodo-iodurée de Gram. Il traile par 

 l'huile d'aniline jusqu'à transparence parfaite ; l'huile extrait une grande 

 partie du violet. La préparation est immergée dans le xylol, puis montée 

 dans le baume. 



Enfin, des solutions d'autres couleurs d'aniline peuvent déplacer une 

 couleur qui n'est pas très fortement fixée et substituer leur coloration. 

 On obtient alors des colorations de contraste ; la couleur employée en 

 dernier chasse la première coloration sur les éléments qui ne retiennent 

 pas énergiquement leur première nuance. Ainsi, dans une préparation 

 de crachats tuberculeux colorés à la fuchsine par la méthode d'Ehrlich 

 à l'eau anilinée, puis plongée dans la solution bleue de Lœffler, le bleu 

 de méthylène chasse la fuchsine qui imprègne les éléments et les Bac- 

 téries des crachats, sauf celles que fixent les Bacilles tuberculeux qui 

 resteront colorés en rouge. Le bleu de méthylène cède de la même façon 

 au brun de Bismarck. Mais, ce que l'on obtient le plus souvent de cette 

 façon, ce sont des doubles colorations dont il va être question. 



Qu'on se serve de l'un ou de l'autre de ces différents procédés de 

 coloration, l'action du réactif ne se fait que progressivement : les élé- 

 ments les moins avides de couleur la cèdent avant ceux qui la retiennent 

 mieux. En arrêtant donc cette action à différents stades, on obtiendra 

 des aspects divers, certains éléments colorés dans telle préparation 

 seront incolores ou diversement nuancés dans d'autres. Lorsqu'on a 

 affaire à des coupes d'organes où se trouvent des éléments variés, le 

 phénomène suit une marche à peu près régulière. Ainsi, une coupe 

 colorée d'une façon diffuse par une immersion dans le bain de violet 

 de méthyle, traitée par l'alcool absolu, se décolorera graduellement de 

 la façon suivante : la substance intercellulaire perd d'abord sa couleur, 

 puis les fibres conjonctives, le protoplasma des cellules, les noyaux, et, 

 en dernier lieu, les Bactéries. 



6° DOUBLE COLORATION 



Lorsqu'une préparation a subi l'action des réactifs décolorants, il est 

 facile, en faisant agir d'autres substances colorantes, de teindre d'une 

 nuance, différente de la première employée, les éléments qui ont perdu 

 la couleur. On peut obtenir ainsi, dans cette double coloration, par un 

 choix habile des couleurs, des contrastes très utiles pour l'observation 



(1) Wbiobrt, Ziïr Tcclmik der bacteriologischen Untersuchungen ( Yirchow's Arch., 

 R<) LXXXIV). 



