388 PRÉPARATIONS ET ÉTUDE MICROSCOPIQUES. 



Dans ce but, on emploie surtout les bleus d'aniline et l'éosine. Il se 

 peut même qu'il y ait ici plus que mélange d'action des colorants, mais 

 une certaine combinaison du bleu, bleu de méthylène ou bleu azur, 

 couleur basique, avec l'éosine, couleur acide, agissant d'une façon qui 

 lui est propre. 



Le procédé de coloration de Romanowsky (1), qui réussit bien pour 

 les Hématozoaires, donne également de très bons résultats pour les 

 Bactéries. 



Solution de Romanowsky. 



Solution aqueuse saturée de bleu de méthylène médici- 

 nal de Hochst 2 volumes. 



Solution d'éosine (A. G. de Hochst) à 1 p. 1000 5 — 



- Laisser la coloration se faire pendant plusieurs heures, puis laver à 

 l'eau. 



Les mélanges de bleu azur et d'éosine donnent des colorations bien 

 préférables. Comme emploi, le procédé de Giemsa et le procédé de 

 Marino sont tous deux très recommandables. 



Procédé de Giemsa. — On prépare : 



Solution de Giemsa (2). 



Bleu azur II et éosine (mélangés en parties égales) 3 grammes. 



Bleu azur II 0**,8 



L'azur II est un mélange d'azur de méthylène et de bleu de méthylène 

 à parties égales. 



Bien dessécher dans le dessiccateur à acide sulfurique, pulvériser 

 finement, passer au tamis de soie; mélanger par agitation à 250 grammes 

 de glycérine chauffée à 60°. Ajouter ensuite "250 grammes d'alcool méthy- 

 lique chauffé à 60°; bien agiter; laisser vingt-quatre heures à la tempé- 

 rature de la chambre et filtrer. Cette solution se trouve toute prête 

 chez Grïibler. 



La préparation est fixée à l'alcool absolu ou à l'alcool méthylique 

 (deux à trois minutes). L'excès d'alcool est enlevé avec du buvard. 

 Elle est mise dans un bain colorant formé d'une goutte de la solution 

 précédente par centimètre cube d'eau distillée. La durée du séjour est de 

 quinze à trente minutes. Laver sous un fort jet d'eau. Si la coloration 

 est trop intense, elle peut se réduire par un séjour de quelques minutes 

 dans l'eau distillée. La coloration est favorisée par un chauffage à 30°-40°. 

 D'après Lœffler (3'i, on peut obtenir d'excellentes colorations rapides en 

 faisant agir d'abord comme mordant une solution d'arséniate de soude 

 à 5 p. 100, puis soumettant pendant une à cinq minutes au bain de 

 bleu azur chauffé jusqu'à l'ébullition. 



(1) Romanowsky, Zur Frage der Parasitologie und Thérapie der Malaria (Petersh. 

 med. Wochenschr., 1891). 



(2) Giemsa, Ein Vereinfachung und Vervollkomnung meiner Methylenazur-Methy- 

 lenblau-Eosin-Farbemethode zur Erzielung der Romanowsky-Nochtschen Chromatin- 

 farbung (Centralbl. fur Dakt., 2" Abth., Orig., XXXVIII, 1901, p. 308). 



(3) Loeffler, Neue Verlahren zur Schnelllarbung von Mikroorganismen, in beson- 

 dere der Blutparasiten, Spirochaeten, Gonococcus und Diphtcriebacillen {Deutsche 

 med. Wochenschr., 31 janv. 1907, p. 169). 



