COLORATION DES SPORES. 393 



ne peut pas servir, par contre, pour les cultures en tubes. Elle est sur- 

 tout avantageuse pour l'étude des espèces dont les colonies affectent 

 des formes spéciales, caractéristiques. La figure 185 représente, d'après 

 Koch, une préparation par impression d'une culture de Bacille de la 

 tuberculose. La disposition et le groupement tout spécial des bâtonnets 

 offrent un caractère d'autant plus important qu'on ne les retrouve pas 

 seulement d'une façon constante dans les cultures artificielles, mais, 

 dans le cas particulier, ils affectent les mêmes rapports dans l'organisme 

 lui-même, lorsqu'ils peuvent végéter abondamment en un point. 



On obtient également d'excellents résultats du procédé, en l'appli- 

 quant à l'étude d'espèces qui forment sur les milieux de culture des 

 figures bizarrement contournées, dues à la disposition des éléments de 

 la colonie. 



2° Coloration des spores. 



En traitant les cellules contenant des spores par certains réactifs, la 

 clialeur par exemple, on parvient à colorer ces dernières qui résistent 

 aux procédés de coloration ordinaire. Ces réactifs paraissent agir en 

 diminuant la force de résistance de la membrane, qui se laisse alors 

 imprégner par le colorant. Biichner (1) a obtenu la coloration des 

 spores en les traitant au préalable par l'acide sulfurique concentré, ou 

 par une forte solution de potasse caustique, ou en les soumettant pen- 

 dant une demi-heure à une chaleur sèche de 120°. Aryesky ("2) prend 

 l'acide chlorhydrique dilué et bouillant, Orszag (3) un mélange de 

 4 parties de salicylate de soude à 0,5 p. 100 et 1 partie d'acide acétique 

 à 5 p. 100. Hueppe (4) a donné un moyen infiniment plus pratique de 

 les colorer : c'est de passer de six à dix fois la lamelle dans la flamme 

 bleue du bec Bunsen au lieu de s'arrêter après la troisième, comme on 

 le fait pour la fixation ordinaire; cette méthode n'est naturellementpas 

 applicable aux coupes. 



Les lamelles ainsi passées dans la flamme sont portées dans un bain 

 de fuchsine; on peut employer la solution aqueuse simple ou, mieux, la 

 solution de fuchsine dans l'eau anilinée ou la solution de Ziehl. Elles 

 doivent y rester longtemps, de une demi-heure aune heure. Les spores 

 se montrent alors colorées en rouge intense, les bâtonnets en rouge 

 plus clair. 



Il est facile d'obtenir une double coloration très jolie. Les lamelles, 

 colorées comme il vient d'être dit, sont traitées par l'alcool ou l'acide 

 nitrique très étendu d'eau, ou l'acide sulfurique à 1 p. 100, jusqu'à décolo- 

 ration presque complète, puis portées dans la solution de bleu de méthyle 

 de Lœffler où on les laisse pendant deux minutes, et lavées à grande 

 eau. Les spores se montrent colorées en rouge intense; les bâtonnets 

 sont teints en bleu pâle. Cette méthode de double coloration des spores 

 est applicable aux coupes de tissus. 



(1) Blchnek, Ueber das Verhalten der Spaltpilzsporen zu den Ànilinfarben (Aertz. 

 Intelligenzbl., 1885, p. 370). 



(2) Aryesky, Eine Einfache Sporensl'arbungsmethode (Cenlralhl. fur Bakt., XXIII, 

 1898, p. 329). 



(3) Orszag. Ein einfache VeiTahren zur Fârbung der Sporen (Centralbt. fur fiakt., 

 I, Orig., XLI, 1906, p. 397). 



(4) Huuppr:, Die Metlioden der Baktei'ienforschung, 1887. 



