39 i PRÉPARATIONS ET ÉTUDE MICROSCOPIQUES. 



La méthode de Moeller (1) donne de très bons résultats. On pro- 

 cède de la façon suivante avec les lamelles préparées et simplement 

 séchées : 



1° Fixer deux minutes à l'alcool absolu, puis porter deux minutes 

 dans du chloroforme. Ne pas laver; 



2° Faire agir pendant cinq minutes une solution d'acide chromique à 

 5 p. 100; 



3° Colorer au Ziehl, cinq à six heures à froid, ou cinq à dix minutes à 

 chaud ; 



4° Décolorer au choix par : 



a. L'alcool absolu (ne suffit pas toujours): 



b. L'acide sulfurique à 5 p. 100 (suivi d'alcool) ; 



c. Le chlorhydrate d'aniline à 2 p. 100, quelques secondes (suivi 

 d'alcool ; 



5° Laver et colorer au bleu. 



Klein 2) emploie le Ziehl à chaud pendant six minutes, décolore à 

 l'acide sulfurique, puis recolore au bleu. 



3° Coloration des cils. 



Les cils vibratiles des Bactéries mobiles prenant difficilement la cou- 

 leur, ne se colorant jamais en particulier par les procédés de coloration 

 simples, il est nécessaire, pour les étudier, de recourir à des méthodes 

 spéciales. Nous allons décrire les meilleures des méthodes conseillées, 

 en insistant cependant sur ce point qu'elles ne donnent trop souvent 

 que des résultats imparfaits, bien qu'on s'attache à suivre à la lettre les 

 prescriptions établies par leurs auteurs. Quelques détails ont déjà été 

 donnés page 38: nous ne les répéterons pas ici où seront seulement 

 exposées les méthodes les plus recommandables. 



D'une façon générale, on doit se servir de préférence d'une jeune cul- 

 ture sur gélose du microbe que l'on veut étudier à ce point de vue. On 

 en prélève une parcelle qui est délayée dans 2 ou 3 centimètres cubes 

 d'eau distillée. Si l'on se sert d'une culture en bouillon, il faut la 

 prendre très jeune, dès que le trouble apparaît. Zeltnow tue la culture 

 avec quelques gouttes de formol et la laisse déposer pendant un ou 

 deux jours; le dépôt est lavé avec de l'eau formolée à 1 p. 100, puis avec 

 de l'eau distillée et enfin dilué dans une quantité suffisante d'eau distil- 

 lée. Avec les dilutions ainsi obtenues, on prépare plusieurs lamelles. 

 Pour obtenir de belles préparations, il faut que la dilution soit suffisante 

 pour que les éléments se trouvent souventisolés. Il faut éviter leschocs 

 et les heurts qui cassent très facilement les cils si fragiles. Il faut éviter 

 tout ce qui peut être autre que les éléments microbiens ; les mordants 

 fixent la nuance sur tout, ce qui nuit à la netteté delà préparation. Les 

 lamelles doivent être parfaitement propres, ainsi que les lames 

 employées. Elles doivent être gardées dans un mélange d'alcool et 

 d'éther. Le contact des doigts doit être évité, même pour l'eau de 

 lavage; de la matière sébacée pourrait être entraînée et adhérer à la 



(!) Moeller, Ueber eine neue Méthode der Sporenfârbung {llentralbl. fur Bukl., X, 

 1891, p. 273). 



(2) Klein, Eine eint'ache Méthode zur Sporenfârbung iCcnlralhl. fur Hakl., XXV. 

 L899, p. 376). 



