396 PRÉPARATIONS ET ÉTUDE MICROSCOPIQUES. 



Il se produit fréquemment, dans les préparations, des précipités gra- 

 nuleux qui fixent le colorant et empâtent le tout, empêchant de distin- 

 guer les cils. 



2° Méthode de Xicolle et Morax (méthode recommandée). — Nicolle 

 et Morax (1) ont avantageusement modifié la manière de faire indiquée 

 par Lcetfler. Les lamelles simplement desséchées sont traitées par une 

 grosse goutte de bain mordant préparé, comme l'indique Lceffler, avec 

 du tannin à Téther de très bonne qualité ; on chauffe une dizaine de 

 secondes sur une petite flamme (bec veilleuse). Dès que les vapeurs 

 apparaissent, on lave doucement et l'on recommence deux ou trois fois 

 le mordançage et le lavage. On colore en versant de la fuchsine de 

 Ziehl sur la préparation et en chauffant une ou deux fois pendant un 

 quart de minute; on lave et Ton examine dans l'eau. Si la préparation 

 est réussie, on sèche et l'on monte dans le baume. 



3° Méthode de Bunge (2). — Le mordant est composé de trois par- 

 ties d'une solution aqueuse saturée de tannin et une partie de solution 

 de perchlorure de fer à 1 p. 20. A 10 centimètres cubes- de ce mélange, 

 on ajoute 1 centimètre cube de solution aqueuse concentrée de fuchsine. 

 Le liquide doit être préparé d'avance et laissé à l'air pendant quelques 

 semaines ; il prend alors une teinte rouge brun; on le filtre au moment 

 de s'en servir. On y laisse pendant cinq minutes les lamelles simplement 

 préparées par dessiccation. On lave et sèche, onjcolore ensuite à chaud 

 quelques minutes par la fuchsine phéniquée. Pour employer ce liquide 

 aussitôt, Bunge conseille d'y ajouter quelques gouttes d'eau oxygénée 

 et de filtrer ensuite. 



4° Méthode de Van Ermenghem (3) (méthode recommandée). — C'est 

 une imprégnation des cils par de l'argent réduit. Traiter les lamelles, 

 fixées par la chaleur, pendant une demi-heure à froid ou de cinq à 

 dix minutes à 60° par le bain fixateur : 



Acide osmique à 2 p. 100 1 partie. 



Tannin en solution aqueuse à 25 p. 100 2 parties. 



Acide acét ique, 4 gouttes. 



Laver à l'eau distillée. 



Sensibiliser dans une solution aqueuse de nitrate d'argent à 0,5 p. 100 

 (il est bon parfois d'aller jusqu'à 2 p. 100), pendant une demi-minute à 

 deux minutes, en toutcas jusqu'à ce que la préparation prenne une teinte 

 grisâtre. L'argent se fixe sur les cils et les corps microbiens. Ne pas laver. 



Plonger dans un bain réducteur ainsi composé : 



Acide gallique 5 grammes. 



Tannin 3 — 



Acétate de soude fondu 10 — 



Eau 350 — 



(1) Nicolle et Morax, Technique de la coloration des cils (Ann. de l'Inst. Pasteur, 

 VII, 1893, p. 554). 



(2) Bouge, Ueber Geisselfarbung von Bakterien (Forlschr. der Med., XII, 1801, n° 12). 

 — In., Weitere Mittheilungen ùber Geisselfarbung (Ibid., XII, 1891, n° 24). 



(3) Van Erhenobeh, Nouvelle méthode de coloration des cils de Bactéries {Travaux 

 du laboratoire d'hygiène et de bactériologie de l'Université de Gand, I, 1893). 



