408 MÉTHODES BIOLOGIQUES. 



Les proportions du mélange donnent le taux de l'agglutination. 



La manière de faire la plus commode est celle qui a été instituée par 

 Widàl l) pour le sérodiagnostic de la lièvre typhoïde. 



On mélange dans un verre de montre une goutte de sérum à 9, 29, 49, 

 99 gouttes du liquide de culture. On a ainsi des dilutions à 1/10, 1/30, 

 1 50, 1/100. Dans la pratique, on peut se contenter d'abord des dilu- 

 tions à 110 et 1/30, puis, s'il y a agglutination, chercher alors plus 

 loin, arriver même, si l'on veut mesurer exactement le pouvoir aggluti- 

 nant, à 1, 1000 et au-dessus. \ 



Au lieu de gouttes, on peut prendre des fractions plus petites, une 

 ose de fil de platine, par exemple. On prélève 9 oses de liquide de cul- 

 ture dans des conditions aussi similaires que possible ; on les dépose 

 successivement sur un verre de montre ou sur une lamelle porte-objet, 

 en rangées ou en cercle ; puis, avec la même ose passée préalablement 

 dans la flamme et refroidie, on prend une ose de sérum que l'on dépose 

 au centre; on repasse le fil à la flamme et on mélange bien le tout; 

 avec le mélange, on fait des préparations. 



Pour plus de facilités, on peut, au préalable, diluer le sérum en en 

 mélangeant une goutte à A ou 9 gouttes d'eau, et avoir ainsi des dilu- 



Fig. lS'i. — Pipette-mélangeuse pour sérodiagnostic. 



lions à 1/5 ou 1 10. Il est facile de calculer le taux d'agglutination sur 

 -ces bases. 



Pour arriver à une mensuration absolument exacte, le mieux serait 

 d'employer de petites pipettes comme celle de la figure 186, jaugées au 

 1/10 de centimètre cube dans la partie effilée, portant comme mélan- 

 geur un renflement de 2 centimètres cubes. Avec un tube de caoutchouc 

 placé à l'extrémité terminale, on aspire exactement 1/10 de centimètre 

 cube de sérum ou d'une dilution de sérum au taux connu, puis 9 divi- 

 sions du liquide de culture. Une aspiration suffisante fait pénétrer le 

 tout dans le réservoir; on agite bien pour mélanger complètement, et, 

 en soufflant, on dépose sur les lames des quantités de liquide suffisantes 

 pour les préparations. 



Le liquide sur porte-objet est recouvert d'une lamelle et la préparation 

 est examinée au microscope. 



L'agglutination, si elle se produit, peut être instantanée ; dans ce 

 cas, on peut même distinguer à l'œil nu des grumeaux dans le mélange. 

 Le microscope montre de gros amas et pas ou peu de microbes libres. 

 Elle peut ne se produire que lentement et graduellement, sous l'œil de 

 l'observateur au microscope, demander même un temps assez long, un 

 quart d'heure, une demi-heure, une heure même ; être complète ou 

 incomplète ; dans ce dernier cas, il reste des microbes libres en dehors 

 des amas de ceux qui sont agglutinés, microbes qui peuvent même 

 rester encore mobiles s'ils l'étaient auparavant. Ce sont là des caractères 



(lj W'iuai. et Sicard, Htude sur le sérodiagnostic et sur la réaction agglutinante 

 chez tes syphilitiques [Ann. de l'Inst. Pasteur, XI, 1897, p. 353). 



