POUVOIR OPSONJSANT. 413 



surtout au moment de s'en servir pour la réaction, par une agitation 

 douce et longue, globules blancs et globules rouges. On trouve d'ordi- 

 naire, dans les préparations, un nombre suffisant de leucocytes; mais 

 la recherche et la numération sont forcément un peu plus longues. 



Émulsion microbienne. — Elle est obtenue dune culture de 

 l'espèce qui détermine l'infection en vue de laquelle on opère la réaction. 

 Pourêtrebonne, l'émulsionnedoitpas être épaisse etètre très homogène. 

 On choisit, de préférence, une culture sur gélose âgée de vingt-quatre 

 heures environ, les cultures âgées pouvant déterminer de la phagocy- 

 tose spontanée. Une petite quantité de culture est émulsionnée le mieux 

 possible par agitation dans de la solution physiologique. L'émulsion ne 

 doit pas contenir trop de microbes, ce qui gênerait; elle doit n'offrir 

 qu'une très légère opalescence, et, en préparation microscopique ordi- 

 naire, ne montrer que des individus bien isolés et pas trop nombreux, 

 pour pouvoir être comptés facilement dans un champ de microscope. 

 Les quantités de culture et de solution seront aisément déterminées par 

 ces conditions. Une petite pratique met d'ailleurs très vite à même 

 d'arriver vite. Pour les microbes qui ne se dissocient pas facilement, 

 il faut alors recourir à la trituration au mortier d'agate avec la solution 

 physiologique, puis passer à travers un linge fin pour ne pas avoir de 

 grumeaux. La technique devra naturellement se modifier selon les 

 particularités des cultures dont on voudra user. 



Pour le Bacille tuberculeux, Wright recommande de prendre d'une 

 culture en bouillon âgée d'un mois à un mois et demi, les vieilles cul- 

 tures renfermant souvent des amas filamenteux difficiles à dissocier. On 

 stérilise à 110°, filtre sur papier et lave les bacilles à la solution physio- 

 logique. Le dépôt est ensuite broyé au mortier etémulsionné au mieux 

 avec de l'eau salée à 1,5 p. 100 pour éviter toute phagocytose spon- 

 tanée, en l'ajoutant goutte par goutte. On centrifuge légèrement, pour 

 enlever les grumeaux. On dilue convenablement avec de l'eau salée 

 à 1,5 p. 100, et répartit dans de petits tubes que l'on stérilise à 115°. 

 Une telle émulsion peut se conserver longtemps; avant de se servir 

 d'un tube, on l'agite fortement, puis on le laisse quelques minutes en 

 repos pour faire déposer les grumeaux qui ont pu se former et n'en pas 

 trouver dans le liquide supérieur. 



Sérums. — On doit faire intervenir du sérum à examiner et du sérum 

 normal. 



On recueille dans un petit tube quelques gouttes du sang du malade 

 par piqûre du doigt, ou bien de celui d'animaux d'expérience par 

 piqûre de l'oreille. La coagulation se fait. Le sérum est soutiré dans une 

 pipette effilée; il faut, pour cette dernière partie, éviter les globules 

 rouges qui nuisent au pouvoir opsonique. Le sérum peut être conservé 

 en pipette scellée pendant une huitaine de jours, ou mieux à la glacière, 

 sans que le pouvoir opsonisant diminue sensiblement. 



Pour le sérum normal, on procède de la même façon sur la personne 

 ou l'animal choisi. 



Technique de la réaction. — On mélange parties égales d'émulsion 

 de leucocytes, d'émulsion microbienne et de sérum. Pour cela, on se 

 sert avantageusement de petites pipettes dont la partie étirée a au moins 

 5 à (5 centimètres de calibre régulier, terminées par une section bien 

 nette; celle partie est marquée d'un index à l'encre ou au crayon gras 



