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drate d'aniline qui a l'avantage de nuire beaucoup moins que les acides 

 aux éléments cellulaires qui peuvent se rencontrer dans les prépara- 

 tions. C'est, sans contredit, le meilleur décolorant à employer ; il a 

 toutefois l'inconvénient d'être assez coûteux et ennuyeux à préparer, 

 parce qu'il faut toujours employer des solutions fraîches. 



Les préparations sont colorées dans la solution de Ziehl pendant dix 

 minutes à un quart d'heure, placées pendant quelques secondes dans 

 une solution de chlorhydrate d'aniline à 2 p. 100, ou même 4 et 5 p. 10<>, 

 puis décolorées par l'alcool. La coloration de fond se fait à volonté. 



Procédé de Ilauser(l). — L'action décolorante des acides minéraux peut 

 être trop énergique : en prolongeant un peu trop l'action du bain acide, 

 le Bacille tuberculeux peut être décoloré. Les acides organiques ont des 

 effets moins violents ; Pétri préconise dans ce but l'acide acétique 

 glacial ; Watson Cheyne, l'acide formique ; Gornil, Alvarez et Tavel. 

 l'acide oxalique. Hauser préfère les acides tartrique, citrique et surtout 

 lactique, à 5 à 10 p. 100 en solution aqueuse ou à 2 ou 3 p. 100 en solu- 

 tion alcoolique. La préparation colorée au Ziehl à chaud, comme il a été 

 indiqué ci-dessus, est soumise pendant quelques minutes au bain déco- 

 lorant aqueux ; ce contact peut même être prolongé pendant une demi- 

 heure sans que, pour la majorité des Bacilles, la teinte baisse sensible- 

 ment : avec les solutions alcooliques, quelques secondes suffisent. 



Procédé de Spengler. — L'acide picrique avait été signalé par Kuhne 

 comme donnant de très bons résultats ; on obtient avec lui une colo- 

 ration de fond jaune qui facilite les recherches. 



Spengler (2) recommande la manière de faire suivante. La préparation 

 est colorée à chaud avec la solution de Ziehl, puis traitée pendant quel- 

 ques secondes à Y alcool picrique : 



Solution aqueuse saturée d'acide picrique <><> 



Alcool absolu 10 



Elle est lavée à trois reprises dans de l'alcool à 00°, décolorée par de 

 l'acide nitrique à 15 p. 100, passée à l'alcool à 60° jusqu'à ce qu'il ne 

 reste plus trace de couleur, et enfin lavée à nouveau à l'alcool picrique. 



Les Bacilles sont colorés en rouge foncé ; le fond est jaune. Spengler 

 croit que l'on peut, par cette méthode, distinguer de gros Bacilles longs 

 et granuleux qui seraient des Bacilles bovins et de fins Bacilles unifor- 

 mément granuleux qui seraient des Bacilles humains. 



Procédé de Herman. — Herman (3) utilise comme mordant le carbonate 

 d'ammoniaque à 1 p. 100 dans l'eau distillée et comme colorant la solu- 

 tion de cristalviolet à 3 p. 100 dans l'alcool à 95°. Ces solutions sont 

 mises en flacons séparés et bien bouchés. 



Pour l'usage, on ajoute une partie de colorant à trois parties de 

 mordant et on mélange parfaitement. Les frottis ou les coupes sont 

 traités pendant une minute par le bain chauffé vers 100°, puis décolorés 

 pendant quatre ou cinq secondes par l'aride nitrique à 10 p. 100, lavés 



11) Hauser, Note sur la coloration du Bacille de la T, (Soc. de Biol., 29 oct. 1897 1. 



(2) Spengler, Neue Fârbe Methoden fur Perlsueht und Tuberkelbacillen (Deutsche 

 med. Wochenschr., 1907, n° 9). 



(3) Herman, Sur la coloration du Bacille tuberculeux \.\nn. de Vlnst. Pasteur. 

 XXII. 1908. p. 92i. 



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