s - s BACTÉRIACEES. 



agir l'alcool trop longtemps ; la préparation doit garder une teinte gris 

 bleu. 



La colorai ion ne se fait souvent que par places clans le corps du bâton- 

 net, laissant ainsi un ou plusieurs espaces clairs, représentant les 

 vacuoles dont il a été parlé plus haut; les formes à vacuole se trouvent 

 surtout dans les vieilles cultures, la coloration des éléments jeunes se 

 fait mieux et plus uniformément. 



Les réactions spéciales p. 29) font reconnaître dans les bâtonnets 

 la présence de grains de volutine; pour Hugo Marx (1), ils seraient en 

 rapport avec la virulence et leur présence pourrait faire distinguer un 

 Bacille diphtérique virulent d'un Bacille pseudo-diphtérique. 



En usant de certains colorants, le bleu de méthylène en particulier, 

 on constate qu'il existe, dans le corps proloplasmique, des granulations 

 ou des grains plus gros, sphériques ou ovoïdes, se comportant autre- 

 ment que le reste du contenu. Ces corps apparaissent au microscope 

 colorés d'une nuance bien différente, d'un rouge-rubis brillant avec 

 certaines positions de l'objectif. Babès ("2) les a signalés en 188ô sous le 

 nom de corpuscules métachromatiques Voy. p. 28). Leur présence fré- 

 quente aux extrémités des bâtonnets leur fait donner aussi le nom de 

 corpuscules polaires. 



Leur présence est assez régulière chez le Bue il le de la diphtérie 

 pour qu'on ait cherché à en faire un caractère différentiel. On 

 a imaginé, pour mieux les mettre en vue, des méthodes de colo- 

 ration spéciales dont les préférables sont celles de Crouch (3) el de 

 Neisser (4). 



Méthode de Crouch. — La solution colorante employée est la suivante : 



Solution de Crouch. 



Solution de verl de méthyle à I |>. 100 . 5 pari ies. 



Solution de violet de dahlia à 1 p. L00 1 partie. 



Eau 4 parties. 



Laisser la coloration se faire pendant une seconde pour, les Ba- 

 cilles des cultures, pendant deux secondes pour les Bacilles des fausses 

 membranes. On peut faire une double coloration avec la vésuvine 

 ou le bleu de méthylène pendant deux à trois secondes. Laver à l'eau 

 ordinaire. 



Les bâtonnets ainsi colorés (fig. 281; montrent à chaque extrémité un 

 petit grain rouge-rubis surtout bien net à la lumière de la lampe ; il est 

 des bâtonnets qui en montrent jusqu'à quatre de grosseur semblable ou 

 différente; beaucoup de ces grains du milieu des bâtonnets paraissent 

 nettement divisés à un très fort grossissement. 



Os grains se rencontrent dans les bâtonnets des cultures laites à 

 toutes températures jusqu'à 37°. 



(1) Hugo Maux el Waithe, Ein Verfahren zur Virulenzbestimmung der Bakterieri 

 (Arch. fur klin. Chir., XL1I, 1900, p. &80). 



(2) Corn il et Baiiès, Les Bactéries, 3 e édition, t. II. p. 58. 



3) Crouch, The détection of the diphteria bacillus l>y ils peculiar réaction toward, 

 certain stains- (New Yorkmed. Joarn., LXII, L895, n° 14). 



i 'n Neisseh, Zur Différenciai liagnose der Diphteriebacillus (Zeilschr. fur Hygiène, 

 \.\IV, 1897, p. i ;:ii. 



