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à la production de substance toxique par le microbe. Toutes les causes 

 qui favorisent la production d'acide dans la culture sont défavorables 

 pour la production d'un liquide bien actif, et inversement. Aussi, au fond, 

 le but de la plupart des procédés recommandés est d'empêcher plus ou 

 moins cette formation d'acide au début des cultures ou de fixer l'acide 

 dès qu'il est produit pour l'empêcher d'agir. On arrive ainsi, au moyen 

 de divers artifices, à une production plus rapide et plus abondante de 

 substance active. 



Lorsqu'on arrive à empêcher l'acidité de se produire, la formation de 

 toxine est beaucoup plus rapide et plus abondante. Les cultures faites 

 dans de bonnes conditions peuvent atteindre leur maximum en six à huit 

 jours. Au début, la marche du développement de la toxine est à peu 

 près parallèle à celle des produits alcalins; puis le pouvoir toxique peut 

 ensuite diminuer en même temps que l'alcalinité augmente encore (1). 



Pour une rapide production de toxine, il paraît important de tenir 

 les cultures en un repos parfait. 



Toutefois, dans cette question d'acidité, tout ne dépend pas unique- 

 ment du milieu; le microbe lui-même peut être mis en jeu. Il est des 

 races ou variétés qui donnent plus facilement de l'acide que d'autres 

 dans un même milieu ; l'expérience démontre que, pour obtenir de bonne 

 toxine, il faut de préférence choisir ces dernières (2 i. 



On peut avoir avantage à exalter la virulence et le pouvoir toxigène 

 du Bacille dont on veut se servir. On y parvient en le faisant passer 

 plusieurs fois par le cobaye, par inoculation sous-cutanée, reprenant de 

 la matière d'ensemencement dans la sérosité de l'œdème formé à l'endroit 

 de la piqûre (p. 835), ou bien en employant la méthode des sacs de 

 collodion introduits dans la cavité péritonéale de lapins (p. 356). On a 

 aussi préconisé dans ce but l'utilisation de l'effet favorisant de certaines 

 associations microbiennes, en faisant des cultures mixtes. Gibier (3) 

 et Hilbert (4) ont signalé l'influence favorable du Streptocoque; 

 Finck (5), dans mon laboratoire, celle d'un Cladothrix. Il ne semble 

 pas qu'on puisse tirer des résultats pratiques de ces indications. 



Procédé de Roux et de Yersin. — Roux et Yersin ont remarqué 

 que la toxicité du liquide augmentait plus rapidement et plus réguliè- 

 rement quand la culture se faisait en présence d'air fréquemment re- 

 nouvelé. Pour y arriver, on se sert avantageusement de ballons à fond 

 plat munis d'une ou deux tubulures latérales (fig. 282 et 283) dans les- 

 quels on met le bouillon en couche d'une faible épaisseur, 2 à 3 centi- 

 mètres; dans de tels ballons, d'une capacité suffisante, on peut facile- 

 ment mettre de 400 à 500 centimètres cubes de bouillon. Ces ballons, 

 fermés par un tampon d'ouate, sont stérilisés à l'autoclave à 120°, puis 



(1) Cobett, Contribution à l'étude de la physiologie du Bacille diphtérique (Ann. île 

 Vlnst. Pastenr, XI, 1897, p. 251). 



(2) Roussel, Quelques procédés pour la production de la toxine diphtérique. Thèse 

 de Nancy, 1000. 



(3) Gibier, Description d'un procédé permettant d'obtenir une toxine diphtérique 

 extratoxique (Soc. de Biol., 1897, p. 393). 



(4) Hilbert, Ueber Steigerung der Giftproduction der Diphteriebacillen bei Sym- 

 biose mit Streptokokken (Zeitschr. fur Ili/uiene, XXIX, 1898). 



(5) Finck, De l'augmentation de toxicité des cultures diphtériques par association 

 au Bacille de Loeffler d'une espèce du ^-enre Actinomyces {Journ. de physiol., 1902, 

 p. 515). 



