BACILLUS DIPHTERIE. 843 



mande tout spécialement le bouillon de panse, obtenu comme il a été dit 

 page *23l, avec des estomacs de porcs; la fermentation delà viande de 

 veau a permis de détruire toutes traces de matières sucrées. 



Le liquide sera disposé, en couche de 5 à 8 centimètres de hauteur, 

 dans de larges ballons, et ensemencé en surface, la matière d'ensemen- 

 cement devant flotter sur le liquide. Après un jour ou deux à rétuveà37°, 

 le voile apparaît, puis s'épaissit; il tombe d'ordinaire vers le quatrième 

 jour, puis il s'en reforme un nouveau qui tombe définitivement vers le 

 sixième jour. C'est du cinquième au sixième jour d'habitude que le 

 liquide a son maximum de toxicité et qu'il convient de le filtrer; vers 

 le huitième, l'activité diminue déjà. 



On doit protéger le voile formé en laissant les cultures dans le 

 plus grand repos, évitant même toutes les trépidations, qui pourraienl 

 le faire tomber avant le moment voulu et nuire à la bonne réussite de 

 l'opération. 



Ce bouillon donne de très bons résultats avec le Bacille américain. 

 La toxine obtenue a souvent une haute virulence, pouvant tuer le 

 cobaye de 250 grammes en quinze à vingt ou quarante heures à de- 

 doses de 1 /100 e , l/200 e et même 1/500 6 de centimètre cube. 



Toutefois, le procédé, mis en œuvre très fidèlement, donne aussi des 

 insuccès ; il est bon d'en être prévenu. 



Deuxième procédé de Spronck. — Spronck (1) a préconisé la 

 décoction de Levure. Un kilogramme de Levure de commerce, non de 

 Levure de brasserie, est délayé dans 5 litres d'eau; le tout est mis à 

 bouillir pendant vingt minutes en agitant constamment avec une spatule. 

 La décoction est versée dans un ou plusieurs vases cylindriques et 

 laissée en repos pendant vingt-quatre heures. La Levure se sépare en 

 laissant au-dessus d'elle un liquide louche qu'on décante. A ce liquide 

 légèrement acidulé, on ajoute par litre 5 grammes de sel marin et 

 20 grammes de peptone Witte de Rostock; on neutralise avec de la 

 soude et l'on ajoute encore par litre 7 centimètres cubes d'une solu- 

 tion de soude normale. On chauffe, filtre sur papier, répartit dans des 

 matras et stérilise à 120". 



Procédés plus simples. — On réussit souvent bien en employant la 

 simple méthode suivante, basée sur l'addition de craie seule : du bouillon 

 de viande de bœuf peptonisée à 2 p. 100, additionné d'une petite quan- 

 tité de craie (10 grammes par litre environ), est réparti dans des ballons 

 de 1 à 2 litres, stérilisé à 115°, puis ensemencé avec un Bacille virulentet 

 simplement placé à l'étuve à 37°. Le bouillon, filtré après un mois ou 

 six semaines, peut tuer un cobaye de 340 à 400 grammes en trente-six 

 heures à la dose de 1/10° de centimètre cube. Cette observation démontre 

 bien que la production d'acide dans le milieu est la cause réelle de la 

 lenteur et de la difficulté dans la formation de substance active. 



On obtient aussi d'excellents résultats en se servant de la macération 

 de viande de Loeffler {Fleisch-infus-peptpn, p. 231 ) préparée avec 2 p. KM» 

 de peptone Chapoteaul, qu'on alcalinise à la soude jusqu'à réaction 

 alcaline très nette au papier de tournesol, ou bien à laquelle on ajoute, 

 après neutralisation aussi exacte que possible. 7 centimètres cubes de 

 solution normale de soude. 



il) Spronck, Préparation de la toxine diphtérique; suppression de l'emploi delà 

 viande (Ann. de l'Inst, l'usteur, XII, 1898, p. 701). 



