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Wassermann et Proskauer 1) sont arrivés à de semblables résultats. 

 Mais pour eux on n'obtiendrait pas de cette façon le poison diphtérique 

 pur: le précipité serait en grande partie formé d'albumoses du milieu de 

 culture ayant entraîné mécaniquement la substance toxique. 



Brieger et Boer (2) ont décrit récemment une autre méthode, plus 

 pratique, pour obtenir la toxine diphtérique. La toxine est traitée parle 

 double de son volume d'une solution de chlorure de zinc à 1 p. 100. Le 

 précipité zincique, lavé avec soin, est fortement agité avec une solution 

 de bicarbonate d'ammoniaque à 3 p. 100, ou à 6 p. 100 pour les grandes 

 quantités de liquide, solution dont on prend un volume égal au volume 

 de toxine mis en œuvre. Ensuite, on ajoute une quantité suffisante de 

 phosphate d'ammoniaque (ce qui peut précipiter déjà une partie de 

 toxine) jusqu'à redissolution complète, et qu'il ne reste qu'un trouble dû 

 au phosphate de zinc. On laisse déposer ce fin précipité blanc, on filtre 

 sur papier dur pour recueillir le précipité métallique, on lave bien et l'on 

 sature le filtralum avec du sulfate d'ammoniaque. Le précipité qui se 

 forme alors renferme quantitativement la substance toxique diphté- 

 rique. On redissout ce précipité dans l'eau, on l'agite avec du sulfate de 

 soude finement pulvérisé: on peut ainsi, en procédant à plusieurs 

 reprises, éliminer les peptones qui ont été éventuellement précipitées 

 avec la toxine, peptones qui se trouvent encore en mélange dans le 

 filtrat du précipité formé par le sulfate de soude avec une plus ou moins 

 grande quantité de toxine. Quand on opère sur des liquides riches en 

 albumine, on n'arrive pas par ce procédé à éliminer complètement 

 l'albumine. On peut cultiver le Bacille diphtérique sur les milieux 

 dépourvus d'albumine; les auteurs, à l'exemple de Guinochet, donnent 

 la préférence à l'urine humaine dialysée. On n'obtient ainsi que peu de 

 toxine, mais elle est dépourvue d'albumine et de peptones. 



La toxine pure ainsi obtenue ne présente pas les réactions des albu- 

 mines ni des peptones. Elle est optiquement inactive et se comporte 

 d'une façon tout à fait passive envers les réactions habituelles de la 

 chimie organique. L'alcool, l'éther, l'acétone la décomposent rapide- 

 ment; de même les acides, même l'acide carbonique: tandis que dans 

 les solutions alcalines faibles ses propriétés biologiques ne se modifient 

 pas. Les agents oxydants, comme le permanganate de potasse, même 

 en solutions extrêmement faibles et très fai blement alcalinisées, la décom- 

 posent presque instantanément, tandis que les substances faiblement 

 réductrices, comme le sulfate de fer, en solutions faiblement alcalines, 

 ne modifient pas sa puissance, même après vingt-quatre heures. 



Les corps bacillaires dont on a extrait complètement la toxine diffu- 

 sible par une agitation de plusieurs heures (dix-huit à vingt) avec une 

 solution concentrée de chlorure ammonique, ou, comme le conseille 

 Kossel (3j, par un lavage au carbonate de soude ou à la lessive de soude, 

 renferment encore une substance active qui, inoculée à faible dose sous 

 la peau des cobayes, détermine en quarante-huit heures des accidents 

 locaux de suppuration et de nécrose tout spéciaux. 



(1) Wassermann et Proskauer, Ueber die von den Diphtcriebacillen erzeugten 

 Toxalbumine [Deutsche mecl. Wochenschr., 1891, n° 17). 



(2) Brieger et Boer, Ueber die Toxine der Diphtérie und der Tetanus (Deutsche 

 rned. Wochenschr., 1896, n° 49). 



(3) Kossel, Zur Kenntniss des Diphteriegiftes (Centralbl. fur Bakt.,X\X t 1896, p. 977). 



