BACILLUS DIPHTERI/E. 887 



0,5 p. 100; on filtre et l'on ajoute au produit du sérum de sang de mou- 

 ton à parties égales ou en proportion de 3 pour 2 de gélose. On fait 

 bouillir le mélange pendant un quart d'heure à une demi-heure ; on 

 filtre et l'on stérilise à la vapeur. On voit qu'il est nécessaire de prendre 

 du sérum stérile. Il faut éviter de chauffer pendant plusieurs heures, 

 le milieu en souffrirait. Pour l'usage, on fait fondre à chaud la quantité 

 voulue et on la coule dans des boîtes de Pétri stérilisées. Après solidifi- 

 cation, on ensemence comme d'habitude. 



Les plaques mises à l'étuve, retournées le couvercle en bas, montrent 

 après douze heures, quelquefois môme après huit heures, de petites 

 colonies de Bacille de la diphtérie. Après vingt heures, ces colonies sont 

 bien visibles à l'œil nu avec leur aspect arrondi, leur milieu sombre un 

 peu jaunAtre," leur bord transparent. Les colonies de Streptocoque et de 

 Staphylocoque s'en différencient très bien. 



Gélose au sérum de Joos. — Joos (1) dit obtenir de très bons résultats 

 du milieu suivant, dit sérum-agar de Joos : 300 centimètres cubes de 

 sérum sanguin sont mélangés à 50 centimètres cubes de solution nor- 

 male de soude et 150 centimètres cubes d'eau distillée ou de bouillon. 

 Le mélange, placé dans une fiole à fond plat, est mis, pendant deux ou 

 trois heures, au bain-marie à 60°-70°. On laisse alors la température 

 s'élever à 100°, ou, mieux, on place le ballon pendant une demi-heure à 

 trois quarts d'heure dans le stérilisateur à vapeur ; on ajoute ensuite 

 500 centimètres cubes de bouillon peplonisé à 2 p. lOOet 20 grammes de 

 gélose qu'on fait dissoudre le plus vite possible. Ouand la solution est 

 faite, on filtre à chaud, on répartit dans des boîtes de Pétri ou dans des 

 tubes de provision et l'on stérilise pendant un quart d'heure à 110° à 

 l'autoclave. Ce milieu très transparent a la consistance de la gélose or- 

 dinaire avec une couleur un peu plus foncée. On peut prendre indiffé- 

 remment du sérum de cheval, de bœuf, de porc ou de mouton. 



Le développement du Bacille de la diphtérie est très rapide sur ce 

 milieu. Souvent on peut déjà apercevoir de très petites colonies après 

 quatre à cinq heures à 37°; après dix à douze heures, les colonies sont 

 déjà bien développées et plus grosses que celles que présente le sérum 

 de Loeffler après le même temps. On les voit à l'œil nu comme de petites 

 colonies grisâtres, d'apparence humide ; au microscope, à un faible 

 grossissement, elles sont granuleuses, d'un brun noirâtre, avec des 

 bords irréguliers, filamenteux. Le Streptocoque et les Staphylocoques 

 demandent plusde temps pourcroître; leurs colonies sont à peine visibles 

 après vingt-quatre heures. 



La gélose glycérinée ordinaire donne de très bons résultats, mais les 

 espèces autres que le Bacille de la diphtérie y poussent trop vite; la 

 différenciation devient plus difficile. 



Michel (2) vante l'emploi du sérum de cheval additionné de 1 partie 

 de bouillon de Loeffler pour 3 de sérum. Le Bacille de la diphtérie \ 

 pousse beaucoup plus vile que sur sérum simple, ou (pie sur sérum 

 de bo-uf simple ou additionné d'une même quantité de bouillon de 

 Loeffler. Mais c'est un milieu également très favorable aux autres 



(]) Joos, Untersuchungen iïber Diphleriediagnose (Centralbl. fur Bakt., XXV, 1899. 

 p. 296 et 351). 



l'J) Michel, I>;i^ YVaclistum der Diphteriebacillen auf verschiedenen Sera und Glvcr- 

 rinagar (Centralbl. fur Ba.Ul., XXII. 1897, p. 259). 



