84 Dreifachfärljung. 



besten kalkhaltiges Leitungswasser, und ein wenig Anilin wasser (vgl. 

 Reg. IV) hinzufügte. Hierauf werden die Schnitte mit Alkohol be- 

 handelt, dann mit Alkohol, dem 0,1% reine Salzsäure zugesetzt ist, 

 Übergossen und abermals mit reinem Alkohol ausgewaschen. Dieses 

 Auswaschen gilt es sehr vorsichtig auszuführen, namentlich den Salz- 

 säure-Alkohol nur sehr kurz einwirken zu lassen, danüt nicht zu viel 

 Safranin den Schnitten entzogen wird. Im allgemeinen ist die er- 

 wünschte Farbenentziehung sehr rasch vollzogen. Nach Abspülung 

 in Wasser wird der Objektträger auf etwa 1 bis 3 Min., unter Um- 

 ständen aber auch kürzer oder länger, in eine etwa 1-proz., wäss- 

 rige Lösung von Gentianaviolett gestellt. Man wäscht ihn dann rasch 

 in Wasser aus und überträgt ihn in eine 1-proz. wässrige Lösung von 

 Orange G., welche man 1 bis 5 Min. auf die Schnitte einwirken läßt^). 

 Dann wäscht man zunächst die Schnitte in Wasser, dann in Alk. 

 abs. aus, setzt die Waschung in NelkenöP) fort, so lange, wie blaue 

 Gentianawolken aus den Schnitten entweichen, trägt dann in Xylol 

 gelösten Kanadabalsam auf und bedeckt mit dem Deckglas. In zyto- 

 logischen Präparaten sollen dann die Cliromosomen intensiv rot er- 

 scheinen, ebenfalls die Nukleolen, wenn auch oft mit einem Stich ins 

 Violette, die Spindelfasern bzw. die Verbindungsfäden rein violett, das 

 übrige Zytoplasma hell-bräunlich (vgl. die entsprechende Figur im 

 letzten Abschnitt). Es ist darauf zu achten, daß man nicht mehr Ka- 

 iiadabalsam aufträgt, als unter dem Deckglas festgehalten wird. Daß 

 man nur sehr dünne Deckgläser benutzen darf, ist für diese Unter- 

 suchungen, die bei starker Vergrößerung vorgenommen werden sollen, 

 selbstverständlich. Vorteil bringt es, über große Deckgläser zu ver- 

 fügen, welche die Bedeckung verhältnismäßig langer Schnittbänder 

 zulassen. Auch diese müssen, wie die Objektträger (vgl. S. 76) gut 

 gereinigt sein. Da sie beim Putzen leicht zerbrechen, muß Vorsicht 

 geübt werden. Wir verfahren meist in der von W. J. G. Land vor- 

 geschlagenen Weise ^), indem wir die Deckgläser erst in eine Glas- 

 reinigungs-Flüssigkeit bringen, die aus einem Gemisch von Schwefel- 

 säure vmd Kaliumbichromat besteht, dann unter der Wasserleitung 

 abspülen, um die Säure ganz zu entfernen, dann noch naß in Alkohol 

 überführen und schließlich bis zum Gebrauch in 95-proz. Alkohol 

 aufbewahren. Beim Gebrauch nimmt man das Deckglas vorsichtig 

 und langsam aus dem Alkohol, berührt mit seiner nach unten ge- 

 haltenen Kante ein staubfreies Fließpapierstückchen, welches den über- 

 schüssigen Alkohol absaugt, und hält das Glas über eine Flamme, um 

 den letzten AlkohoLrest zu entfernen. Dann legt man das Glas noch 

 warm dem Präparat auf. — Die Dauer der Einwirkung der einzelnen 

 Farbstoffe und ihres Auswaschens ist für jedes Objekt auszuprobieren. 

 Sie fällt je nach der Natur des Objektes und der Art seiner Fixierung 

 verschieden aus. Während beispielsweise bei der Färbung des Inhalts 

 bestimmter in Teilung begriffener Pollenmutterzellen das Einhalten 

 der eben empfohlenen Dauer beim Färben, Auswaschen, Entwässern 

 und Aufhellen sich bewährte, erhielten wir an Schnitten durch Fucus- 

 Oogonien die besten Resultate, wenn die Safraninfärbung nur eine 



^) Vgl. hierzu auch Reg. IV Orangeverfahren. 



") Auch fUissiges Terpineol wird empfohlen (s. Reg. IV). 



3) W. .1. G. Land, Bot. Gaz., Vol. LIX. inif). S. 401. 



