368 XVII. Inverse Tinktion. 



verbleiben die Schnitte 30 Min. oder länger. Sodann werden sie etwa 

 5 Min. lang in Wasser gewaschen, durch Alkohole von steigender Kon- 

 zentration in Alk. abs. überführt, wo man sie solange (ca. 5 Min.) läßt, 

 bis keine auffallenden Farbstoffwolken mehr entweichen. Sie werden dann 

 schnell in Terpentin, aus diesem in Xylol gebracht und in Kanadabalsam 

 eingeschlossen. In den auf diesem Wege der inversen Färbung herge- 

 stellten Präparaten erscheint der Zellinhalt nur ganz schwach grau oder 

 violett, einzelne Teile gar nicht gefärbt. Die Zellulose-Zellwände erscheinen 

 schwach, verschleimte Zellwände stärker violett gefärbt. Was jedoch sofort 

 bei solchen Präparaten ins Auge fällt, das sind die stark violett gefärbten 

 Stärkekörner, deren Verteilung in der Zelle sich damit sehr leicht stu- 

 dieren läßt, während die Leukoplasten grau sind und sich kaum in der 

 Färbung vom Zytoplasma abheben. — Soll das Zytoplasma ganz ungefärbt 

 bleiben und damit der Gegensatz zu den leuchtend violett gefärbten Stärke- 

 körnern noch stärker werden, so beizt man die Schnitte nur mit 2-proz. 

 Tannin und zwar etwa 30 — 60 Min. lang. Hierauf wäscht man in Wasser 

 aus \ind überträgt die Präparate auf 30 — 60 Min. in wässr. Gfentianaviolett. 

 Die Differenzierung im Alkohol muß vorsichtig geschehen, damit die Ent- 

 färbung nicht zu stark werde. Am besten wechselt man die schwächeren 

 Alkohole rasch und läßt die eigentliche Entfärbung in Alk. abs. sich voll- 

 ziehen. — Hat man die Absicht, das Zytoplasma stärker zu färben, wobei 

 natürlich die Stärkekörner in ihrer Färbung nicht so auffallen, dann läßt 

 man die Schnitte länger in Brechweinstein. Je länger sie darin ver- 

 bleiben, desto stärker wird das Zytoplasma, auch die achromatischen 

 Bestandteile der Teilungsfiguren gefärbt. — Diese Methoden lassen sich 

 auch mit einer Färbung der Zellkerne, sowie der Chromosomen ver- 

 binden. Man durchfärbt z. B. die Objekte vor dem Einbetten in Paraf- 

 fin mit Parakarmin. Die Kerne behalten dann auch während der in- 

 versen Tinktion ihre schöne rote Farbe. Auch kann man Schnitte von 

 ungefärbten Objekten mit Fuchsin S. färben und dann invers tingieren; 

 da sich dann in Brechweinstein die Fuchsintinktion sehr schön differen- 

 ziert, so daß fast nur die Kerne gefärbt bleiben, so erhält man auf 

 diese Weise sehr schöne Doppelfärbungen. Auch nach der HEroEN- 

 HAiN sehen Methode kann man die Schnitte färben, worauf man invers 

 tingiert. In solchen Präparaten erscheinen die Kerne schwarz, das Zyto- 

 plasma schwarzgrau, die Stärkekörner leuchtend violett. — Gentiana- 

 violett gibt die schönsten Resultate. Mit großem Vorteil läßt sich aber 

 auch Safranin, wie es beim Flemming sehen Dreifarben verfahren angewendet 

 wird, benutzen. Nach einer sukzessiven Beizung mit Tannin und Brech- 

 weinstein bekommt man sehr schöne Zytoplasmafärbungen. Die Stärke- 

 körner treten wohl nicht so scharf hervor, sind jedoch gut zu sehen. 

 Falls man bloß mit Tannin beizt, erhält man eine ebenso reine und aus- 

 schließliche Färbung der Stärkekörner, wie mit Gentianaviolett. Auch 

 Smaragdgrün, mit Fuchsin S. kombiniert, gibt schöne Bilder. — Nemec 

 wandte die beschriebene Methode mit großem Erfolg bei seinen Statolithen- 

 studien an, wobei sich überraschend schöne Bilder der Verteilung von 

 Stäi'ke in Zellen und Geweben darboten. Er weist darauf hin, daß man 

 mit Hilfe dieser inversen Methode auch Pilzhyphen in den Zellen sehr 

 klar färben kann, da deren Wände sich ebenso intensiv wie Stärkekörner 

 färben. Besonders beim Studium der Mykorrhiza in Neottia -Wurzeln 

 leistete diese Methode gute Dienste. 



