464 XXI. Bakteriennachweis in Geweben. Isolierte Bakterienfärbung. 



ist hingegen dauernd haltbar. Die Färbungsfähigkeit der Ehrlich- 

 schen Lösung wird noch gesteigert, wenn zu 100 com des gesätt. 

 Anihn Wassers 1 com einer 1-proz. Natriumhydratlösung und hierauf 

 statt alkohol. Farbstoff lösungen 4— 5 g festes Fuchsin, Methylviolett 

 oder Methylenblau hinzugefügt und die Lösung tüchtig geschüttelt 

 wird^). 



Es dürfte sich nur in den seltensten Fällen empfehlen. Schnitte 

 aus frischem Gewebe auf Bakterien zu untersuchen. 

 Viel vorteilhafter, und meistens durchaus notwendig, ist es vielmehr, 

 solche Gewebe zuvor zu härten. Zur Härtung hat sich für diese Zwecke 

 der Alk. abs. am besten bewährt, da bei Anwendung anderer Här- 

 tungsmittel das Gelingen der späteren Färbungen weniger sicher 

 wird. Die im Alkohol zu härtenden Gewebestücke sollten nicht über 

 haselnußgroß sein und mindestens 3 Tage in verhältnismäßig großer 

 Menge öfters erneuerten Alk. abs. gelegen haben. — Nicht alle Bak- 

 terien lassen sich gleich leicht färben. Fast stets erfolgt aber eine 

 Färbung bei Anwendung einer starken alkalischen Lösung von Me- 

 thylenblau, die als das universellste Färbungsmittel für Bakterien 

 gelten kann. Diese Lösung wird hergestellt, indem man 30 ccm konz. 

 alkohol. Lösung von Methylenblau in 100 ccm Kalilauge 1 : 1000 

 bringt-). Die Färbung ist in wenigen Min. vollzogen, worauf die 

 Schnitte in 0,5-proz. Essigsäure abgespült, weiterhin in Alkohol ent- 

 wässert werden und durch Zedernholzöl oder Xylol in Kanadabalsam 

 gelangen. 



Wünscht man nur bestimmte Bakterien in den Schnitten gefärbt 

 zu behalten, so sucht man die übrigen sowie die Gewebe wieder zu 

 entfärben. Die Bakterien widerstehen im allgemeinen der Entfärbung 

 besser als die Gewebeelemente, zeigen andererseits verschiedene 

 Widerstandsfähigkeit. Am häufigsten wird für eine solche ,, Isolierung", 

 d. h. isolierte Bakterien färb ung, die Gram sehe M e - 

 t h o d e 3) angewandt. Diese ist im besonderen dadurch ausgezeich- 

 net, daß sie eine Färbung der Kerne in den Gewebezellen bewirkt, 

 ohne die Färbung der meisten Bakterien zu verändern. Die Schnitte 

 werden zunächst mit Anilinwasser-Methylviolett oder Anilinwasser- 

 Fuchsin gefärbt. Man stellt sich diesen Farbstoff, ähnlich wie wir 

 es zuvor schon getan, her, indem man 5 ccm reines Anilinöl zu etwa 

 95 ccm Aq. dest. zusetzt, gehörig schüttelt und durch ein zuvor an- 

 gefeuchtetes Filter filtriert. Zu dem klaren Anilin wasser werden nun 

 11 ccm einer konz., alkohol. Methylviolettlösung (am besten das im 

 Handel mit Methylviolett 6 B oder BN bezeichnete [vgl. auch Reg. IVJ 

 Methyl violett) zugesetzt, nochmals durch ein angefeuchtetes Filter 

 filtriert und schließlich 10 ccm Alk. abs. hinzugefügt^). Diese Lö- 

 sung hält sich etwa 14 Tage. Die mit dem Anilin wasser-Methyl- 

 violett gefärbten Schnitte werden direkt oder nach leichtem Ab- 

 spülen in Alkohol, in eine Jodjodkaliumlösung übertragen, die auf 

 300 T. Aq. dest. 2 T. Jodkalium und 1 T. Jod enthält. Dort ver- 

 weilen sie 1 — 2 Min. Infolge des in der Jodjodkaliumlösung erfolgten 



1) Fr. Löffler, Zentralbl. f. Bakteriol., Bd. VI, 1889, S. 213. 



2) Nach Fr. Löffler, Mitt. Kais. Gesimdheitsamt, Bd. IT, 1884, S. 4.3!). 



3) Fortschr. d. Mediz., Bd. II, 1884, S. 185. 



*) Nach C. Weigert u. R. Koch, Mitt. Kais. Gesundheitsamt, Bd II, 1884, S. 6. 



