504 XXlll. Mucor: Fixierung. Färbung. Objoktträgerkultui-. 



Trägt mau unversehrtes Material in Alk. abs., in Chromsäure, Chrom- 

 säuregemische oder Pikrinsäure ein und färbt hierauf in entsprechender 

 Weise, so bekommt man im Wandbeleg der Myzelschläuche wie der Sporangien- 

 träger, die zahlreichen kleinen, durch Plasmastränge verbundenen Zellkerne 

 zu sehen. Diese sind auch im Sporangium und, wenn auch schwieriger, in 

 den Sporen nachzuweisen. Am besten hat sich für die Fixierung der 

 Pilze die schwächere FLEMMiNGSche Lösung bewährt und für das darauf- 

 folgende Färben, Safranin -Grentianaviolett- Orange. In den meisten Fällen 

 mußte die Safraninlösung 1/2 Std., das Gentianaviolett 15 Min., das Orange 

 nur sehr kurze Zeit einwirken. Dann wurde mit Alkohol und Nelkenöl 

 rasch ausgewaschen (s. S. 84). Bei Herstellung von Dauerpräparaten be- 

 währte sich venez. Terpentin, auch Griyzerin (s. S. 41 Off.). — Sind die 

 Hyphen der Pilze zu dick, als daß auf diesem einfachen Wege der Zell- 

 inhalt in seinen einzelnen Teilen gut sichtbar gemacht werden könnte, so 

 muß man die Untersuchung an Mikrotomschnitten vornehmen (vgl. dazu 

 Reg. IV Pilze, Fixierung und Färbung). 



Mucor Mucedo ist ein geeignetes Objekt, um uns in Pilzkulturen auf 

 dem Objektträger einzuführen^); die hier zu sammelnden Erfahrungen 

 sollen dabei jene ergänzen, die wir bei den Bakterien gewonnen haben. 

 Wir bereiten uns eine den Bedürfnissen dieses Mucors entsprechende Nähr- 

 flüssigkeit, indem wir . Pferdemist in Wasser auskochen. Das erhaltene 

 Dekokt wird klar abfiltriert, dann wieder längere Zeit gekocht, um es zu 

 sterilisieren. Die zu benutzenden Objektträger und sonstigen Glasgeräte 

 führt man aus gleichem Grund durch eine Spiritus- bzw. Gasflamme, oder 

 legt sie vor Beginn des Versuches für kurze Zeit in Alk. abs., hierauf in 

 Äther, der rasch nach dem Herausnehmen verdunstet. Es empfiehlt sich 

 auch, die zur Verwendung kommenden Glassachen in 10-proz. Salzsäure 

 aufzubewahren, erst vor dem Gebrauch herauszunehmen und mit seit Stunden 

 kochendem Aq. dest. auszuspülen. Auf so gereinigten Gläsern läßt sich 

 dann auch der Nährlösungstropfen gut ausbreiten, was von nicht geringem 

 Vorteil ist 2). Es gilt nun, eine Spore zur Aussaat zu bringen. Dies wird 

 auf folgende Weise erreicht^). Man überträgt mit der Pinzette aus einer 

 rein gehaltenen Kultur ein Sporangium in ein Uhrschälchen, das mit ab- 

 gekochtem Wasser erfüllt ist. In diesem haben die Sporen, durch die 

 quellende Zwischensubstanz, die sie trennt, auseinander getrieben, sich als- 

 bald gleichmäßig verteilt. Ist die Zwischensubstanz aufgelöst, so wird mit 

 einer in der Flamme desinfizierten Nadel ein Tröpfchen Flüssigkeit aus 

 dem Uhrgläschen genommen und in langgezogenem Strich auf den Objekt- 

 träger aufgetragen. Dieser Strich wird hierauf unter dem Mikroskop durch- 

 mustert. Enthält er nur eine Spore, so ist er ohne weiteres für die Kultur 

 geeignet; sind im Strich mehr als eine Spore vertreten, so wird der Über- 

 fluß mit einem Läppchen weggewischt. Auf die Spore wird hierauf ein 

 Tropfen von der Nährlösung gebracht, der Objektträger auf das Zinkgestell 

 der feuchten Kammer gesetzt und mit einer Glasglocke überdeckt, deren 



1) Vgl. O. Brefeld, Verb. d. Pbys.-med. Gesellsch. in Würzburg, Febr. 1874; 

 Landw. Jahrb., IV. Jahrg., H. 1, 1875;' Sitzber. der nat. Freunde zu Berlin, 15. No- 

 vember 1875. 



*) Vgl. auch die Angaben auf S. 508. 



3) Vgl. a. S. L. SCHOUTEN, Zeitschr. f. wias. Mikrosk., Bd. XXXI, 1905, 

 S. 10 ff.; imd A. W. Nieuwenhitis, Versl. gew. Vergad., Naturk. Afd. Kon. Akad. 

 van Wetensch., Ainsterdam, 1910, 8. (525) ff. und die Methode von O. Hagem, 

 Reg. IV PUze Rem-Kultur: 



