Fermente: Mpthoileii zur Darstellung von Fermenten. 7 



den erfordert. Die aufgetaute Masse wird im Achatmörser mit physiologi- 

 scher ClNa-Lösung verrührt und gröbere korpuskulare Elemente abzentri- 

 fugiert, so dali eine opaleszierende Lösung ül)rig- bleibt. 



Mehr auf die \'erarbeitung- von tierischen (Jrganen zugeschnitten ist 

 die /eiklcinerungsmethode von Wiechowski^), die an anderer Stelle be- 

 schrieben ist. 



Es ist nicht niögiich und wäre auch eine unnötig;e Wiederholung', die 

 Darstellung alier gebräuchlichon Fermentpräparate zu beschreiben. Als typi- 

 sche Beispiele mögen die folgenden geniigen: 



Darstellung des Invertins. 



Verfahren von W. A. Oshorne. -) 



V2 % Preljhefe wird zunächst mit 1/0 1 Oß^/oigem Alkohol angerieben, 

 nach 16 — 24 Stunden abfiltriert. Es geschieht dies hauptsächlich, um die 

 Eiweißkörper zu koaguheren. (Heute dürfte das nicht mehr nötig sein, da 

 man nötigenfalls nach L. Michaelis ^j nachträglich das Eiweiß leicht durch 

 Kaolin entfernen kann.) Der gut abgesaugte Rückstand wird mit 500 em^ 

 Chloroform wasser (5 cm'^ Chloroform auf 1 / Wasser) 6 Tage lang unter 

 häufigem Um schütteln bei oO — ^5° erhalten, dann durch große Faltenfilter 

 gebracht und das Filtrat gleich in 1 Z-Gef äßen aufgefangen , die zu drei 

 Vierteln mit OG^/oigem Alkohol gefüllt sind. Der in dem Filtrat sich so- 

 fort bildende Niederschlag wird zuletzt auf ein Filter gebracht, mit Alkohol 

 gewaschen, im Vakuum unter Schwefelsäure getrocknet. Zur Reinigung von 

 den Aschenbestandteilen erwies sich die Dialyse am wirksamsten. 



Verfahren nach L. Michaelis. 



Die Alkoholbehandlung des vorher beschriebenen Verfahrens, welche 

 die Entfernung der Eiweißkörper zum Hauptzweck hatte, kann auf folgen- 

 dem Wege umgangen werden, welcher darauf beruht, daß Kaolin alle Ei- 

 weißkörper, nicht aber das Invertin adsorbiert: 100 ^r Preßhefe werden mit 

 der nötigen Menge Sand zerrieben. Es ist nicht nötig, die vollkommene 

 Zerreibung, wie zur Darstellung der Zymase, anzustreben. Dann wird die 

 Masse 3 — 6 Stunden mit 200 cm'^ Chloroformwasser (1 cm^ auf 100 cm^ 

 Wasser) geschüttelt und dann durch Filtrieren oder scharfes Zentrifu- 

 gieren der flüssige Extrakt vom Bodensatz getrennt. Es ist nicht nötig, 

 völUge Klarheit des Extraktes schon jetzt anzustreben. Dann werden je 

 100 cm^ Extrakt mit 15 — 20,(/Kaohn portionenweise unter Schütteln ver- 

 setzt. Man achte darauf, daß die Reaktion andeutungsweise sauer ist; 



*) Wilh. Wiechowski, Eine Methode zur chemischen und hiologischeu Untersuchung 

 überlebender Organe. Hofmeisters Beiträge. Bd. 9. S. 232 (1907). 



*) T['. A. Osborne, Beitrage zur Kenntnis des Invertins. Zeitschr. f. physiol. Chem. 

 Bd. 28. S. 399 (1899). 



^) L. Michaelis, Die Adsorptionsaffinitäten des Hefe-Invertins. Biochem. Zeitschr. 

 7. 488 (1908). 



