Fermente : Methoden zur Darstellung von Fermenten. i;-^ 



der Kochsalzlösung' auch Wasser nehmen) zu f,'leichen Teilen versetzt, einen 

 Tag geschüttelt, weitere 2 — i\ Tage im Eisschrank aufbewahrt, dann filtriert, 

 in kleine, braune Fläschchen eingefüllt und der Korken mit Paraffin ge- 

 dichtet. Diese Stammlösungen sind auf Eis aufbewahrt außerordentlich 

 haltbar; je konzentrierter, um so besser. 



Wenn man sich aus einem trockenen Fermentprii parat an verschie- 

 denen Tagen exakt vergleichbare Lösungen für (|uantitative Zwecke 

 herstellen will, so beachte man. daß viele festen Ferment präparate 

 zum überwiegenden Teile aus wasserunlöslichen \'erunreinigungen bestehen, 

 welche das gesamte, in ihnen enthaltene Ferment nur sehr allmählich an 

 das W^asser abgeben. Man bekommt daher bei nicht restlos löshchen Prä- 

 paraten niemals Lösungen von vöUig gleichartiger Zusammensetzung, wenn 

 man das Pulver nicht mindestens 24 Stunden mit dem Wasser in Berüh- 

 rung läßt. Auch müssen die äußeren Bedingungen, namenthch die Tem- 

 peratur während des Auslaugens des Präparates einigermaßen konstant 

 gehalten werden. Es ist nämlich ein festes Fermentpulver durch einmalige 

 Auslauguug niemals zu erschöpfen, sondern es scheint sich ein Gleich- 

 gewicht herzustellen, welches von der Temperatur abhängig ist. Will man 

 also z. B. eine jederzeit reproduzierbare Trvpsinlösung bereiten, so rate ich 

 zu folgendem Verfahren. Man hält sich eine möglichst große Menge eines 

 käuflichen Trypsinpräparates vorrätig, entnimmt einen Tag vor Anstellung 

 der eigentlichen Versuche 0"2 g desselben und löst es in 20 o;^^ W^asser, 

 indem man es während der ersten 2 Stunden öfter umschüttelt und dann 

 l)is zum nächsten Tag im Eisschrank stehen läßt. Am nächsten Tage wird 

 die Lösung filtriert, die ersten Tropfen des Filtrates werden verworfen, 

 um eine etwaige Adsorptionsaffinität des Filtrierpapieres zum Ferment erst 

 al)zusättigen. Diese Lösung brauche mau nur für einen, höchstens für zwei 

 Versuchstage. Im allgemeinen dürfte eine solche Methode der Aufbewahrung 

 in Lösung für' längere Zeit vorzuziehen sein. Energisches Schütteln von 

 Fermenten im Schüttelapparat ist dagegen zu vermeiden, weil ^iele Fer- 

 mente dadurch erheblich an Wirksamkeit einbüßen. So berichten Abderhalden 

 und Guggenheim^), daß Tvrosinase sowie die peptolytischen Fermente des 

 Hefepreßsaftes durch 48stündiges und auch kürzer dauerndes Schütteln ihre 

 Wirksamkeit einbiUien. Es tritt bei letzterem dabei eine Trübung ein. 

 Auch sonst wird ein solches Vorkommen berichtet. Wahrscheinlich beruht 

 diese Erscheinung auf derselben L'rsache, aus der eine Eiweißlösung beim 

 starken Schütteln koaguliert : es bilden sich fortwährend neue Oberflächen, 

 an denen eine irreversible ..Häutchenbildung" stattfindet. Es wäre das 

 also eine auf Adsorption an der Oberfläche beruhende Veränderung. Nach 

 Signe und S/gval Schmidt-Nielsen'-) ist Lablösung gegen Schütteln ganz 



') E. Abderhalden und M. Gugc/eiiheim, Versuche über die Wirkung der Tvro- 

 sinase etc. Zeitschr. f. physiol. Chemie. Bd. 54. S. 352 (1908). 



-) Sif/»e und Sigcal Schmidt-Xielsen , Zur Kenntnis der .,Schüttelinaktivieruug~ 

 des Labs. Zeitschr. f. physiol. Chemie. Bd. 60. S. 426 (1909). 



