Fermente: Methoden z. qiialit. u. quant. Verfolgung der Fermentwirknng. 21 



durch Verfolfjung- der Tvrosinabschoidnn^- kontrolliert werden. Durch 

 Filtrieren und Wägen des ahgeschiedenen Tvrosins oder Ai)zentrifugieren 

 dieser Aminosäure in kalibrierten Köhrehen lälJt sich bei gleichen Bedin- 

 gungen die Methode auch zu einer (luantitativen gestalten. 



e) Ferner kann man zum Nachweis trvptischer Fermente auch die 

 Spaltung geeigneter Polypeptide nach E. Abderhalden benutzen. Den p]in- 

 tritt der Spaltung erkennt man entweder durch das Auskristallisieren schwer 

 löslicher Aminosäuren ') oder durch die Drehungsänderung im Polarisations- 

 apparat.-) 



Für den ersten Zweck ist sehr geeignet das Glycyl-1-tyrosin. ^ian 

 versetze z. B. 5 cm^ der auf Ferment zu prüfenden Lösung mit 02 ^ Oly- 

 cyl-1-tyrosin und 2 Tropfen Toluol. Nach mehrstündigem Aufenthalt im 

 Brutschrank beginnt eine Trübung aufzutreten, die nach einiger Zeit zur 

 Abscheidung der unter dem Mikroskop leicht erkennbaren Kristalle von 

 Tyrosin führt. 



P'ür den zweiten Zweck kann man ebenfalls Glycyl-l-tyrosin verwenden 

 oder besser d-Alanyl-glycin, welches keine unlöslichen Produkte liefert und 

 klar gelöst bleibt. Man versetze z.B. 6 cm"' der zu prüfenden klaren Flüssig- 

 keit l)ei spurweise alkalischer Reaktion mit 1 (/ des Dipeptids . fülle die 

 Mischung in ein Polarisationsrohr von geeigneten Dimensionen ein, lese 

 die Drehung ab und halte es im Brutschrank bei o7°. In geeigneten Inter- 

 vallen, je nach dem Fermentgehalt in Minuten oder Stunden, lese man wieder 

 ab und konstatiere die Drehungsänderung. 



Bekanntlich geht die heutige Auffassung dahin, in dem Trypsin ein Ge- 

 misch von Fermenten anzunehmen, und es gibt außerdem Fermente im Darm- 

 saft, in Hefepreßsäften und an anderen Orten, welche im Gegensatz zum Pepsin 

 die gemeinsame Eigenschaft haben, daß sie bei saurer Reaktion nicht oder 

 schlechter wirken als bei alkalischer Reaktion. Man kann die einzelnen 

 Fermente, wo sie "gemischt vorkommen, nicht trennen. Man kann somit 

 auch nur von einem Nachweis der verschiedenen ^Yirkungen sprechen. 

 Die proteolytische Wirkung läßt sich am schnellsten durch die Methode 

 der Serumplatten nachweisen, wobei jedoch zu bedenken ist. daß die Emp- 

 findlichkeit dieser Methode nur mäßig groß ist, die Spaltung von Kasein 

 ist nicht ganz auf eine Stufe damit zu setzen, weil sie. wenn auch schwach, 

 auch von den ereptischen Fermenten gegeben werden soll 3), welche sonst 

 nur die nicht meiir koagulablen Eiweißkörper abbauen. Der direkte Nach- 

 weis der Erepsinwirkung geschieht durch die Spaltung von Peptonen bis 



M Literatur darülier in den einzelnen weiterhin zitierten Arbeiten von Ahder- 

 hahlen und Mitarbeitern. 



-) E. Ahderhalden und Ä.H.Kölker. Die Verwendung optisch-aktiver Polypeptide zur 

 Prüfung der ^^'irksamkeit proteolytischer Fermente. Zeitschr. f. phvsiol. Chem. Bd. 51. 

 S. -294 (1907). 



^) Cohnhciin, Umwandlungen des Eiweißes durch die Darmwand. Zeitschr. f. 

 phvsiol. (bem. Bd. 33. S. 451 (1901): Weitere Mitt. über Erepsiu. Ibidem. Bd. 35. 

 134 (1903). 



