Feniieiite: Methoilcii z. qualit. u. quantit. Verfolgung d. Fermentwiikiing. •>';) 



Mciiuc (Icstillicrtciii Wasser (Miiiu'c Stiiiidcii im Schüttclappurat /u scliütteln. 

 Chcr die Reaktion des .Mediums lal'it sich allgemeines nieht angeben: es 

 <>il)t Lii)asen (pflanzliche), welche nur l)ei sehr deutlich saurer Reaktion 

 (2Vo Kssiusiuire) wirken, und andere, die neutrale oder alkalisehe Reak- 

 tion erfordern. Im Zweifelfalle setze man daher das Reaktionsgeraisch in 

 :> verschiedenen Proben, sauer, neutral und alkalisch, an. 



Der Siiuretiter einer jeden Mischung wird dann zunächst festgestellt, 

 indem eine abgemessene Probe mit gleichem Volumen absolutem Alkohol 

 versetzt wird, um die in Wasser unlösHchen Fettsäui-en in Lösung zu 

 bringen, und mit Phenolphtalein gegen Vio n Na OH titriert wird. Nach 

 Ablauf von Stunden oder Tagen wird an einer zweiten Probe diese Titra- 

 tion nach Alkoholzusatz wiederholt und so die Entstehung freier Fettsäuren 

 nachgewiesen. Man beachte, daß eine ausbleibende Fermentwirkung unter 

 Umständen durch Zusatz von Mangansulfat in Gang gesetzt werden kann, 

 welches nach Connstein und Hoycr^) bei pflanzliehen Lipasen. als Akti- 

 vator wirkt. Man nehme auf etwa lOcm^ Ölemulsion ö cin^ einer Lösung 

 von MnSO^ (4:1000). Als Desinfiziens verwenden Connstein und Hoyer 

 Chloralhydrat. 



Ein Beispiel über die Mengenverhältnisse eines Lipasenachweises (nach 

 Paul Mayer) : Je 5 ciii^ einer 2°/oi&6n wässerigen Emulsion von Lezithin 

 ..Agfa" werden mit 1 cm^ „Steapsin" (Grübler) im Reagensglas versetzt, 

 und je eine solche Probe 5, 20 und 40 Stunden im Brutschrank bei 37' 

 belassen, sowie eine Kontrolle ohne Steapsin. 



Danach werden die Proben unter Zusatz von reichlich 91)*6*' /oi»eiii 

 Alkohol quantitativ in ein Bechergias übergeführt und mit Vio Nornial- 

 natronlauge titriert, unter Anwendung einer methvlalkoholischen Lösung 

 von Phenolphtalein als Indikator. Es wird zunächst der Säuretiter der 

 Lösung ohne Ferment bestimmt, welcher übrigens im frischen Zustand 

 und nach dem Aufenthalt im Brutschrank der gleiche ist und auf dem 

 Fettsäuregehalt des Lezithins und des Ferments beruht. Er beträgt füi* 

 5 c?«3 der Lezithinaufschwemmung z. B. 03 cm^ i/^^ n-XaOH, für I cm^ 

 Steapsin 0'4: cin^ i lo n-Xa()H, zusammen also O'l cn/'^ Vio n-Na(JH. Dieser 

 Wert wird bei den übrigen Proben abgezogen. So fand sich z.B.: 

 Nach 5 Stunden: VO cm^ Vio n-XaOH 

 nach 20 Stunden: 15 cw^ i/j,, n-XaOH 

 Titer nach Abzug der ursprünglichen Azidität. 



Ein anderes Beispiel nach Connstein und Hoyer mit ^>rwendung 

 von Ricinuslipase : öy Lipase (Ricinussamen) werden mit 10.'/ Wasser, 

 worin 0"2 y Essigsäure und 0"1 y Chloralhydrat gelöst sind, verrieben. Xach 

 24 Stunden ist zirka 80% der theoretisch möglichen Fettsäure in freier 

 Form vorhanden und durch Titration nachweisbar. 



M Connstein, Hoyer und Wartenherg , Über fcrmcntative Fettspaltun?. Ber. d. 

 Deutsch, ehem. Ges. Js. 35. S. 3988 (1902). 



