Fermente: Darstellung von Oxydasen und Katalasen etc. 57 



Zu diesem liehufe ^Yird folgende Lösung öfters von den Tierphvsio- 

 logen in Anwendung gebracht: 



Paraphenylendiamin i 



a-Naphtol aa. V4-l\)g 



Soda J 



Wasser 100 .y. 



An der Luft wird diese Lösung nach und nach violett , dann blau; 

 aber diese Hirbung kommt nur langsam zustande: Indophenolreaktion. 

 Sie wird durch Pflanzensäfte oder Organextrakte, wie Speicheldrüsen, 

 Milz, Knochenmark, Thymus etc. beschleunigt. Gewisse wirksame Pflanzen- 

 extrakte widerstehen der Siedehitze, so daß es fraglich scheint, ob die Be- 

 schleunigung dieser Reaktion wirklich auf Oxydation zurückzuführen ist. 



Tyrosinase. 



Vorkommen: Dieses Oxydationsferment scheint sehr verbreitet zu sein. 

 Von ihm rührt die Schwar/färbung vieler Pflanzensäfte (Vicia Faba etc.), 

 die Eotfärbung vieler Pilze her (Psalliota campestris. Boletus sp., 

 Armillaria Mellea. Paissula nigricans), die später in Schwarz über- 

 geht (Weizeukleie, Kartoffelschalen). Tyrosinase ist auch bei Avertebraten, 

 speziell in Insektenlarven (Tenebrio molitor, Lucilia Caesar), in 

 dem Sepiablut, in der Tintendrüse vieler Cephalopoden, in den melano- 

 tischen Tumoren von Pferden, in der Haut von pigmentierten Fischen und 

 Kröten (^Melaninbildung) festgestellt worden. 



Nachweis: Da mit dem Ferment in den meisten Pflanzen auch 

 zugleich Tyrosin zugegen ist, so läßt es sich nur indirekt nachweisen. 

 Am einfachsten ist es, von dem Safte zu einer l%o — iVoig'^ß p-Kre- 

 soUösung zuzusetzen; ist Tyrosinase vorhanden und ist der Saft durch 

 doppeltkohlensaures Natron in Überschuß neutral oder besser alkalisch 

 gemacht, so geht die farblose Lösung in Gelb und dann in Orangegelb oder 

 Rot über; fügt man einer anderen Probe am Anfang des Versuches eine 

 Spur von GlykokoU zu, so wird die Reaktion beschleunigt und die rote 

 Farbe kommt gleich zum Vorschein. i) 



Darstellung: A. Kartoffeltyrosinase. 2) Kartoffelschalen (7 bis 

 8 kg) werden nach Befeuchten mit Alkohol mittelst einer Hackmaschine zu 

 einem dicken Brei zerrieben und so rasch wie möglich ausgepreßt. Man 

 lasse den bräunlich gefärbten Saft direkt in ein Glasgefäß füeßen, das zur 

 Hälfte mit starkem Alkohol (94"/oigen) gefüllt ist. Den voluminösen Nieder- 

 schlag läßt man absetzen; die klar gefärbte alkohohsche Flüssigkeit wird 

 mittelst eines Hebers soweit wie möglich entfernt, der Bodensatz auf ein 

 Filter gebracht und noch feucht mit der nötigen Menge destillierten Wassers 

 unter Zusatz von Toluol 1 Tag stehen gelassen; hierauf wird filtriert und 



*) B. Chodat et W. Staub , Nouvelles recherches sur les ferments oxydauts. Ar- 

 chives des Sciences physiques et naturelles. IV^ periode. T. 24. p. 188 (1907). 



^) W. Sfaiib, Nouvelles recherches sur la Tyrosinase in Chodat, Travaux de Tln- 

 stitut de Botanique de PUniversite de Geneve. S^ serie. I. fasc. (1908). 



