Fermente: Darstellung von Ox\ (lasen und Katalasen etc. (31 



O'Oö — O-p/oigP"! NaHCOa) die Fliissif>keit rasch ,G-oldj?elb und mit der 

 Zeit orangegelb. aber nie rot. Solange die Iieiuigung der Tyrosinase nicht 

 soweit fortgeschritten ist, daß eine rote Reaktion mit p-Kresol ausbleibt, 

 so muß dieselbe als mit Aminosiiuren veruni'einigt betrachtet werden. 



Spuren von (ilykokoll, Alanin. Leucin etc. genügen ('aoooooj, um diese 

 gelbe Farbe rasch in Rot überzuführen. War die Lösung am Anfang 

 schwach alkalisch, so geht die schön kirschrote Farbe (man lasse die Rea- 

 genzgläser ruhig stehen) von unten nach oben in Violett und zuletzt in 

 Blau über. Je nach der Stärke der Tyrosinase nimmt der Umschlag von 

 Iiot in Blau 2 Stunden bis 1 Tag in Anspruch. Lösungen von p-Kresol zu 

 '/inoooo zeigen noch diese schöne Reaktion. Lösungen von r\'oigem Kresol 

 verlangsamen die Reaktion; sie kommt am besten zustande bei einer Kon- 

 zentration von ^''looo- Di^ i'ein blaue Endfarbe zeigt einen metallischen^ 

 schillernden, roten (fuchsinartigen) Dichroismus. 



Pyrogallussäure wird ebenfalls oxydiert. Die rotgell)e Farbe ist der 

 durch Lakkase hervorgerufenen ganz ähnlich: Purpurogalhnbildung wurde 

 aber bis jetzt nicht sicher beobachtet. Tyrosinase vermag weder Guajak 

 noch Guajakol zu oxydieren. 



Es werden auch durch reine Tyrosinase oxydiert (in Gegenwart von 

 Glykokoll oder anderen Aminosäuren mit Farbenumschlag wie beim p- 

 Kresol ) : 



Tyrosinhaltige Polypeptide , wie 1-Tyrosinauhydrid , ( ilycyl-l-tyrosin- 

 anhydrid , Gl}"cyl-l-tyrosin, d-Alanyl-glycyl-1-tyrosin, 1-Leucyl-glycyl-l-tyrosin, 

 Tetrapeptid aus Seide (1 l-Tvrosin, 1 d-Alanin und 2 Glykokoll) (nach Chodat 

 und Abderhalden). Die Farbenreaktionen sind jedoch nicht dieselben wie 

 mit Tyrosin. Da aber diese Untersuchungen nicht mit reiner Tyrosinase 

 (außer den von Chodat ausgeführten) ausgeführt worden sind, sind die be- 

 treffenden Angaben nicht ganz eindeutig, da die Verum'einigung mit unbe- 

 kannten Gemengen Aminosäuren die spezifische Reaktion verschieben kann. 



Phenylalanin gibt keine Farbenreaktiou und wird wohl sonst nicht 

 angegriffen. 



Es ist bei solchen Untersuchungen auf Polypeptide auch darauf zu 

 achten, daß der Tyrosinase kein peptolytisches Ferment anhaftet. Die 

 (TCgenwart eines solchen ist, wie folgt, nachzuweisen: 1. durch Bestimmung 

 des Drehungsvermögens im Polarimeter (falls asymmetrische Körper zugegen 

 sind; 2. durch Zusatz von peptolytischen Fermenten (Trypsin) und Ver- 

 gleichung der Reaktionen mit und ohne dieses Ferment. 



Es läßt sich auf diese Weise leicht dartun, daß die erwähnten tyrosin- 

 haltigen Polyeptide als solche oxydiert werden, und daß der Oxydations- 

 wirkung keine hydrolytische Spaltung vorangeht. 



Wie gesagt. A\ird 1-Tyrosin von reiner Tyrosinase zuerst in einen 

 schön rosaroten Körper umgewandelt; später geht die Farbe in Schmutzig- 

 violett über und zuletzt entsteht ein schwarzer Niederschlag, der sich mit 

 der Zeit ausscheidet und absetzt. Dieses schwarze Endprodukt ist Melanin 

 genannt worden (vide: Zur Kenntnis der melanotischen Pigmente und der 



