Fermente: Darstellung von Oxydasen und Katalasen etc. 63 



haltend), steigende Menuen Fermentlösung' und Wasser bis auf 50 cw^ Die 

 Gliiser enthalten der Ileihe nach 0'5, 1, Tö, 2, 5, 10, 15, 20 cm' Ferment- 

 lösung. Die Keaktionsoemische werden 24 Stunden bei Zimmertemperatur 

 stehen gelassen, dann mit je 1 cni^ lOVoiger Schwefelsäure angesäuert und 

 mit 0'002 n-Permanganatlösung bis zur Entfärbung titriert. Gleichzeitig 

 mit der ersten Reihe wird eine zweite Reihe von Gläsern unter genau 

 gleichen Bedingungen mit den Reagenzien beschickt. Die Titration erfolgte 

 hier nach 48 Stunden. 

 Fermentkonzentration 05 10 15 20 50 100 150 200 



A. 24 Stunden lO'S 14-2 17-ä 19-8 25-7 ao-4 aPyß ::J5-8 



B. 48 ,, 13-2 16-0 17-8 20-4 25-(3 :-ir2 34-4 35-4 

 Es ist dies eine logarithmische Kurve: die Menge des Reaktions- 

 produktes steigt mit der Fermentmenge, wenn auch langsamer als letztere: 

 die Reaktion kommt um so schneller zu einem Stillstand, je größer die 

 Fermentkonzentration ist. 



fO Methode \on Chodaf uwd Staub. '^} Bei einer anderen Methode 

 bestimmt man die Wirkungsweise kolorimetrisch. Es werden 0"5^ Bismarck- 

 braun, 05 g Koralhn in 250 cm^ absolutem Alkohol gelöst (P). 



Da bei dieser Methode die Rötung der Tyrosinlösung bestimmt wer- 

 den muß und es sich gezeigt hat. daß andere Farbennuancen am Anfang 

 und später zu beobachten sind, so haben genannte Autoren zwei Skalen 

 hergestellt. 



I. Skala für Spätreaktionen. 



Von der alkoholischen Farb- 

 stoff lösung P .... cni^ 1 1*5 2 2"5 o o-5 4 4'5 5 

 Absoluter Alkohol 19 18-5 17 17-5 17 16-5 16 15-5 15 



IL Skala füi' Anfangsreaktionen. 



^'on der alkohohschen Farbstofflösung P cm^ O'l 0'2 O'o 0"4 0"5 

 Absoluter Alkohol ..19-9 19-8 19-7 19-6 19-5 



Zur Synthese der Tyrosinase. 



Es ist oben gezeigt worden, wie man die Lakkasewirkung durch die 

 eines Systems Peroxydase — Hydroperoxyd ersetzen kann. Es läßt sich aber 

 Tyrosinase durch dieses System nicht ersetzen. Tyrosin wird dabei nicht 

 oxydiert, d. h. durch Hydroperoxyd unter Zusatz von Peroxydase. 



Nun läßt sich aus der Wurzel vonVicia Faba und aus dem Stengel 

 von Philodendron mon Steroid es eine Peroxydase ausziehen, die in 

 Verbindung mit Wasserstoffsuperoxyd die charakteristische Rötung des 

 Tyrosins sowie die TjTOsinasereaktion auf p-Kresol liefert. 



Durch anhaltendes Erhitzen auf 100" wird diese Peroxydase zerstört 

 (es ist die gewöhnliche Peroxydase), aber es bleibt in der Lösung ein in der 

 Siedehitze beständiger Körper, welcher, einer Peroxydase aus Meerrettig 

 zugesetzt, die charakteristische Tvrosinasereaktion liefert. 



') W. Staub, Xouvelles reeherches sur la Tyrosinase, 1. c. 



