Fermente: Darstellung von (Jxydasen und Katalasen etc. 71 



Quantum Ferment oder Organ und in einer bestimmten Versuchszeit zu 

 schätzen. 



Bei solclien Experimenten ist es natürlich unumiiänglich notwendig, 

 für jede Kategorie von \'ersuchen bestimmte Normen zu wählen. In den Ba- 

 telli- und /S^(?rwschen \'ersuehen wird die aktive Masse auf 1 g Substanz und 

 1 Minute Zeit reduziert; z.B.: h cm^ einer Leberemnlsion zu 1/2000 haben 

 in der ersten Minute 25 cm^ Sauerstoff entbunden. Nun enthalten die.se 

 bcm^ 0*0025 Organsubstanz; folglich würde lg desselben Organbreies in 

 der ersten Minute 10000 cm'^ Sauerstoff in Freiheit gesetzt haben. 



Diese volumetrischen Methoden haben den Tbelstand, daß einerseits 

 Übersättigung mit Sauerstoff eintritt, wenn das die Flüssigkeit enthaltende 

 Gefälj nicht geschüttelt wird, während andrerseits beim Schütteln der Ein- 

 fluß der Gefäßwände einen unberechenbaren Faktor darsteUt. 



Da die nach den angegebenen Methoden bereiteten Katalasen so wirk- 

 sam sind, daß ihre verdünnten Lösungen in Wasser nur Spuren organischer Sub- 

 stanz enthalten, so läßt sich die katalytische Kraft durch Titrierung mittelst 

 verdünnter K Mn (J4-Lösung messen, indem dadurch die jeweilige Konzentration 

 der verdünnten Lösung des Wasserstoffsuperoxyds bestimmt A\ird. 



Sorgfältige Messungen (Senter) haben nun dargetan, daß die Reak- 

 tionsgeschwindigkeit in sehr verdünnten ( 1 igo-n^ol^i'en) H, Oo-Lösungen 

 proportional der Fermentkonzentration ist. 



Die Reaktion wird nach Senter'^) in mit Glasstöpseln versehenen 

 Erlenmeyerfiaschen von 300 resp. 1000 cyy^^ Inhalt ausgeführt; 100 resp. 

 400 cm^ Fermentlösung von passender Konzentration werden in einer dieser 

 Flaschen einige Stunden im schmelzenden Eise vorgekühlt und darauf 100 

 resp. 400 cm^ vorgekühlte H., Oj-Lösuug hinzugefügt. Die Temperatur wird 

 sofort nach der Mischung gemessen, um sicher zu sein, daß sie wirklich O*" 

 beträgt; die einzelnen Proben — 25 resp. 100 cm^ — werden von Zeit zu 

 Zeit entnommen, in verdünnte Schwefelsäure gegos.sen. wodurch die Pieak- 

 tion volIstä)idig unterbrochen wird, und darauf mit \ 500-niolarer KMuG^- 

 Lösung titriert. 



Tabelle nach Senter. 

 t (Minuten) Hj O., 0-4343 Kj 



Wasserstoffsuperoxj'dkonzentration immer ' 4-^-molar (in der Mischung), 400 cm ^ Kata- 

 laselösung mit 400 cin^ H, Oo-Lösuug gemischt und 100 cm^ titriert. 



L 1 Vol. Fermentlösung in 320 Vol. Mischung: 



42 — 



10 40-5 0-0017 



20 38-4 0-0023 



4OV3 34-4 0-0023 



851/.3 26-0 0-0027 



116 21-2 0-0028 



160 16-0 0-0028 



194i'o 12-5 00029 



') G. Senter, 1. c. (vgl. Fußnote 1, S. 66), S. 25. 



