248 ^'- ^'"»z- 



Volumen HO" „ii^eu Alkohols und etwas Tierkohle, envärmt sie zum Sieden 

 und filtriert sie noch heiß ab. l)as Filtrat wird auf dem AVasserbade unter 

 Zusatz von Alkohol von Zeit zu Zeit eingedampft bis zum Erscheinen eines 

 Kristallbreies beim P^rkalten. Die so erhaltenen Tryptophankristalle werden 

 aus To*^ „igPiii Alkohol mehrmals umkristallisiert. Das nach der Fälluuii- 

 des Cystins und des Tryptophans in der Verdauunpsflussiiikeit duich 

 Mercurisulf at erzielte Filtrat wird mittelst Schwefelwasserstoffes vom Queck- 

 silber befreit und kann nach Abfiltriereu vom Quecksilbersulfid mit Phos- 

 phorwolframsäure versetzt werden, um auf Amino- und Diaminosäuren i;e- 

 l)riift zu werden. ') 



2. Quantitative Bestimmung des Tryptophans nach Levcnc 

 und Bouilller. 



Das Verfahren von Hopkins und Cok erlaubt keine genaue quanti- 

 tative IJestimmung des Tryi)tophans. Beim Znsatz von Bromwasser zu einer 

 Tr^-ptophanlösung färbt sich diese purpur. Diese Färbung wächst zuerst in 

 Intensität mit dem Bromzusatze; sobald sie aber ihr Maximum erreicht 

 hat, verschwindet sie plötzlich bei Zufügung eines weiteren Tropfens des 

 Brom Wassers. Diese Eigenschaft benutzen Levene und RouUlcr folgendt'r- 

 maßen zur (luantitativen Bestimmung des Tryptophans: Die Lösung der 

 Verdauungsprodukte der Proteine wird mit r)0/oig8r Schwefelsäui'e versetzt. 

 Dann fügt man so lange von der Ilopkins-Coleschen Mercurisulfatlösung 

 hinzu, bis der Zusatz von 1 Tropfen Bromwasser zur oben schwimmenden 

 Flüssigkeit keine Purpuri-eaktion mehr gibt. Nach 24stündigem Stehen wird 

 filtriert. Der Niederschlag wird in höchstens bis 20/0 Schwefelsäure ent- 

 haltendem Wasser aufgeschwemmt, durch Schwefelwasserstoff zersetzt, ab- 

 filtriert. Das Filtrat wird auf dem Wasserbade erwärmt, um den Schwefel- 

 wasserstoff zu vertreiben und auf ein genau bekanntes (iesamtvolumen 

 gebracht. 15 cm^ dieser Flüssigkeit werden in einer P^prouvette mit 2 cui^ 

 Amylalkohol versetzt. Unter tüchtigem Schütteln fügt man tropfenweise 

 Bromwasser hinzu bis zum \'erschwinden der Puri)nrfrirbung des Amyl- 

 alkoholes. Für verschiedene Proben einer und derselben Tryptophanlösung 

 beträgt der Unterschied in der dazu nötigen Bromwassermenge höchstens 

 O'Oo — Ol cm^. In einem aliquoten Teile des nach dem Vertreiben des 

 Schwefelwasserstoffes erhaltenen P'iltrates wird durch die Schwefelbestimmung 

 die in der Tryptophanlösung vorhandene Cystinmenge ermittelt. Man be- 

 rechnet, wieviel Bromwasser zum Sättigen des Cystins nötig ist mid zieht 

 den so erhaltenen Wert von der bei der Titrierung der cystinhaltigen 

 Tryptophanlösung verbrauchten Bromwassermenge ab. Auf diese Weise 

 erfährt man die Anzahl der Kubikzentimeter Bromwasser, welche nötig ist, 

 um das Tryptophan zu sättigen. Vor jeder Analyse ist es ratsam, das Brom- 



*) F. Goirland Hopkins- aud Si/diiei/ W. Cole, A Contribution to the Chemistry 

 of Proteids. Part I. A preliminary study of a hitherto undescribed product of tryptic 

 digestion. Jonrn. of Physiol. Vol. 27. p. 418-428 (1901). 



