Intermediärer Stoffsvechsel : Die Fermente (1. Kohlehydratstoffwechsels etc. ;'>9T 



Buchner iiiid JJuchank liabori mit Hilfe von Aceton eine gewisse 

 Fraktionierung von Ferment und Coferment erreicht. Quantitativ sind die 

 Resultate noch wenig befriedigend. Das liegt aber nicht etwa daran, daß 

 Aceton die Substanzen zerstört. Früher wurde ja schon erwähnt, dal) man 

 ein wirksames Trockenpräparat hersteilen kann, wenn man Preßsaft in 

 Aceton einträufelt, l'm aber Fraktionen zu erhalten , welche sich scharf 

 durch eine verschiedene Fällbarkeit durch Aceton unterscheiden, muß man 

 das Aceton in den Preßsaft eintragen. Denn nur so kann vermieden wer- 

 den, daß vorübergehend die Acetonkonzentration zu hoch ist. Bei diesem 

 Vorgehen entstehen aber stark wasserhaltige Niederschläge, in denen viel- 

 leicht die wirksamen Substanzen durch Fermentwirkungen geschädigt 

 werden. Lediglich auf Verzettelung läßt die mangelhafte Ausbeute sich nicht 

 zurückführen. Denn auch die vereinigten Niederschläge erreichen nicht die 

 Wirksamkeit eines Präparates, welches durch Eintragen des Preßsaftes in 

 das Aceton gewonnen wird. 



Um durch schnelles Arbeiten die einwirkenden Schädigungen mög- 

 lichst abzuschwächen, werden die Niederschläge durch Ausschleudern auf 

 einer Zentrifuge abgetrennt, welche in der Minute 3Ü00 Umdrehungen 

 macht , worauf die überstehende Flüssigkeit einfach abgegossen wer- 

 den kann. 



Im einzelnen gestaltet sich ein Trennungsversuch etwa wie folgt: In 

 100 cwMrischen Preßsaftes aus Berliner Unterhefe, der durch Zentri- 

 fugieren noch von Kieselgursplittern und Hefezellresten befreit ^^^rd, wird 

 unter starkem Turl)inieren eine Mischung von h() crn^ Aceton und öOcw^ 

 Wasser eingetragen. Die entstandene erste Fällung trennt man durch Zen- 

 t.rifugieren vom Niederschlag. Zur Herstellung der zweiten Fällung wird 

 die abgegossene Lösung abermals mit 100 cm^ Aceton versetzt, (xleichzeitig 

 wird die erste Fällung mit 100 cm^ Aceton angerührt. Die Niederschläge 

 werden sodann A\iederum abzentrifugiert. In die von der zweiten Fällung 

 abgegossene Lösung wird hierauf von neuem 200 cm^ Aceton eingetropft, 

 worauf sich die dritte Fällung beim Zentrifugieren als flockiger, aber halb- 

 schmieriger Niederschlag am Boden'' des Gefäßes absetzt. Zu gleicher 

 Zeit werden wiederum die erste und die zweite Fällung mit je 100 cm» 

 Aceton aufgeschwemmt und sodann zentrifugiert. Endlich werden alle drei 

 Fällungen nochmals mit je 100 cw» Aceton und mit je li)0 cm^ Äther 

 durchgerührt, jedesmal hernach zentiifugiert und die Niederschläge schließ- 

 lich im Vakuum über Schwefelsäure getrocknet. Die erste Fällung stellt 

 nun ein feines, weißes Pulver, die zweite ein gelbliches, gröberes Mehl dar, 

 während die dritte eine gelbe, feste und zerreibbare Masse bildet, die sehr 

 zerfließlich ist. 



Die ganze Operation dauert 2 Stunden. Das Verfahren ist so einge- 

 richtet, daß alle ?> Fällungen die gleiche Zeit mit dem Aceton in Berührung 

 bleiben. 



Der Gang des Versuches kann etwa so tabellarisch ^Niedergegeben 

 werden: 



