_^-)^ Alfred Scliit tciiliol m. 



(lari ihre Wirkuiiii' we^^fällt oder erst bei tatielangem Gelieii des Versuches 

 wieder zum \'orsehein kommt. Man kann die Methode dadurch vereinfachen, 

 daß man das Organ auf Glasplatten trocknet und nun sofort wässerige 

 Auszüge des Trockenpulvers macht, ohne dasselbe weiter zu reinigen. Gibt 

 man nun Adenin und Guanin. wie beschrieben, zu und leitet Luft durch, 

 so geht die Desamidierung bereits in einigen Stunden vor sich. 



Eigenschaften der Purindesamidasen: Dieselben sind relativ 

 wenig empfindlich. Sie halten sich in Lösung wochenlang, in Pulver el)en- 

 falls. Durch Erhitzen werden sie dagegen sofort zerstört. Sie dialysieren 

 nicht. Ihre Wirkung äußert sich gleich gut bei schwach saurer, neutraler 

 und schwach alkalischer Keaktion. 



3. Xanthinoxydase. 



Nachweis des Ferments. M 



Derselbe geschieht durch die Umwandlung von Hypoxanthin in Xan- 

 tliin und von Xanthin in Harnsäure. Ob beide Umwandlungen durch ein 

 und (hisselbe f>rment bewirkt werden, oder ob es sich auch hiei- um zwei 

 Fermente handelt, bedarf noch besonderer Untersuchung. Da die Organe, 

 welche Xanthinoxydase enthalten, auch die Purindesamidase in hochwirk- 

 samer Form besitzen, so kann man die lanwandlung der Aminopurine 

 direkt in Harnsäure erreichen. Bei der Auswahl der Organe mulJ man 

 jedoch berücksichtigen, daß in einzelnen neigen der Xanthinoxydase auch 

 eine urikoly tische Fermentation besteht und daß die letztere, indem sie die 

 frisch gel)ildete Harnsäure wieder zerstört, den Nachweis der ersteren er- 

 schweren kann. Sicher gelingt er stets in der Rindeiinilz . welche keine 

 urikolytische Hihigkeit hat. 



:)()() cm^ Pindermilzextrakt werden mit O-ö g in wenig Normalnatron- 

 lauge gelöster Purinbase (Adenin, (iuanin, Xanthin oder Hypoxanthin) und 

 etwas Chloroform und Toluol versetzt: die Mischimg wird auf eine kon- 

 stante Temperatur von oT" gebracht und nun Luft in kräftigem Strom 

 durchgeleitet. Nach wenigen Stunden ist der Versuch beendet und die zu- 

 gegebene Purinbase quantitativ als Harnsäure wiederzufinden. Man verfährt 

 dabei wie zur Isolierung der Purinbasen (S. 425), indem man zunächst ent- 

 eiweißt und dann die Kupfersulfat-Pisulfitmethode verwendet. Das salzsaure 

 Filtrat vom Schwefelkupfer wird auf dem Wasserbade auf ca. 10 cm'^ ein- 

 geengt und dann noch 1 — 2 Stunden stehen gelassen. Die so gewonnene 

 kristallinische Harnsäure kann zur Sicherheit nach Horhaczeivski 2) um- 

 kristallisiert werden. Dabei verfährt man so, daß je Ol g Substanz in 21) cw^ 

 konzentrierter Schwefelsäure, eventuell unter ganz vorsichtigem schwachen 

 Erwärmen gelöst und dann mit dem \derfachen Volumen Wasser wieder 



1) A. Schiffenhehn, fibcr die Fermente des Nukleiustoff wechseis. Zeitschr. f. phys. 

 Chemie. Bd. 57. S. 21 (1908). 



*) ./. Ho7-haczcirski , Über die Trennung der Harnsäure von den Xanthinbasen. 

 Zeitschr. f. phys. Chem. Bd. 18. S. 341 (1894). 



