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V. Gräfe. Nachtrag zum „Sterilisieren höherer lebender Pflanzen". 



Fig. 52. 



trocknen zu verhindern, andrerseits die mögliche Infektion bei Lüften der 

 Zylinderbedeckung zu vermeiden, wird die untere Öffnung des Zylinders 

 mit einer Zelloidinschichte verschlossen, durch die die Nährlösung durch- 

 diffundiert, wenn der Zylinder in die Lösung gestellt wird, während die 

 Pilzkeime zurückgehalten werden. Um die Zelloidinplatte in dem Zylinder 

 anzubringen, stellt man diesen zweckmäßig mit dem zu verschliettenden 

 Ende auf Quecksilber, gießt zirka o — 4 mm hoch Zelloidin in das 

 Rohr und läßt das Alkohol-Äthergemisch abdunsten. In 

 bezug auf späteres Sterilisieren ist zu bemerken, daß das 

 fertig montierte Kulturgefäß mit trockenem ausgeglühtem 

 Sande in den Dampf topf zu bringen ist, nicht schon das mit 

 Knopscher Nährlösung vorher befeuchtete.^) Es gelang auf 

 diese Art, speziell Rübenpflanzen vollkommen steril aufzu- 

 ziehen. Eine andere Methode besteht in der Verwendung 

 von 2" 'oigem sterilen Agar zur Anzucht höherer Pflanzen in 

 weitlumigen Reagenzröhren. Der Agar wird gut gekocht und 

 heiß zweimal durch Filtrierpapier und Watte mittelst 

 der Wasserstrahlpumpe filtriert. Das Filtrat wird in weite 

 Glasschalen gegossen, nach dem Erstarren über die zirka 

 2 cm starke Schichte destilliertes Wasser fließen gelassen 

 und das Ganze sich selbst überlassen. Nach einigen Tagen 

 wird das Wasser, das einen leichten Fäulnisgeruch ange- 

 nommen hat, abgegossen, durch frisches Wasser ersetzt usf. 

 Nach etwa zwei Wochen wird der Agar neu aufgekocht, 

 mit 20Voiger Ktiopscher Nährlösung versetzt und in große 

 Reagenzrohre (20 )iim innere Weite) in 3 — 4 cm hoher 

 Schichte gefüllt. Die Röhren werden dreimal je V2 Stunde 

 im Dampftopf sterilisiert, der Agar muß dann so durch- 

 sichtig sein, daß man Druckschrift durch ihn hindurch 

 lesen kann. Ungeschälte Rübensamen keimen allerdings in 

 solchem Substrate schlecht, geschälte schon etwas besser ; da- 

 her wurden später junge, in Erdkästen im Freien herange- 

 zogene Rübenpflänzchen gewissermaßen als Stecklinge ver- 

 wendet, indem die Wurzeln abgeschnitten und das Hypokotyl mit der Pinzette 

 in die Agarmasse eingeschoben wurde. Die Rübenpflänzchen waren zuvor in 

 stark strömendem Leitungswasser, dann in destilliertem Wasser, schließ- 

 lich in sterilem Wasser gewaschen worden. Die Wurzel wurde mit in Alko- 

 hol sterilisiertem Messer entfernt und schnell mit steriler Pinzette in das 

 bereitgehaltene Röhrchen eingeführt. Die Pflänzchen trieben in wenigen 

 Tagen kräftige Wurzeln, welche bald die ganze Kuppe des Reagenzrohres 

 durchzogen hatten. Der Blattapparat war üppig grün. Pilze traten selbst 

 nach Wochen nicht auf. Aber Hauptbedingung ist. daß der Blattapparat 

 in die Lage versetzt wird, kräftig zu assimilieren. 





Apparat vod Schmidt. 

 (I. =: Wattebausch. 

 h ^ Eeagenzrohr (Gas- 



gliihlichtzylinderi. 

 c ^ Wattering. 

 rf = Becherglas. 

 f, /= Sandschichte. 

 g ^= Zelloidinschicht. 



*) W. Schmidt, Zur Methodik von Infektionsversuchen von hölioren Pflanzen. 

 Zentralblatt f. Bakt. II, Bd. 25, S. 426 (1910). 



