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P. Rona. 



So erhält man bei Benutzung irgend einer Pipette allgemein gültige und 

 vergleichbare Werte. 



Bevor man zu der Tributyrinlösung das Ferment (bzw. die auf das 

 Ferment zu prüfende Flüssigkeit) hinzufügt, muß man die Lösung mit 

 einem passenden ,,Regulatorgemisch" versetzen. Hierdurch erreicht mau, 

 daß man der Lösung eine ganz bestimmte (die optimale oder, falls dies 

 aus besonderen Gründen nötig sein sollte, eine andere gewünschte) Reak- 

 tion erteilt, ferner auch, daß die Reaktion während des ganzen Verlaufes 

 der Spaltung konstant bleibt. Bei der Blut- und Pankreaslipase mit einem 

 Optimum der Wirksamkeit von ca. Ph = 8 — 8'5 wird man, um die Spaltung 

 günstig zu gestalten, ein Phosphatgemisch aus einem Teil primärem 

 Phosphat zu 8 — 10 Teilen sekundärem Phosphat (jedes Vs molar i) zu- 



Fig. 102. 



150 



UO 



130 



120 



9-' 



10 20 30 40 



%JYibutyTin 



50 



60 



70 



80 



90 



fügen in einer Stärke, daß das Gemisch in bezug auf Phosphat i/go — ^^30 

 molar wird. Die Menge der Fermentlösung ist, Avenn möglich, so zu be- 

 messen, daß die Esterspaltung in 1 — 2 Stunden 70 — SO^/o der ursprüng- 

 lichen Tributyrinmenge betrage. 



Als Beispiel für den Verlauf einer solchen fermentativen Esterspaltung 

 diene folgender Versuch. 2) Bei diesem wurden 30 cm^ gesättigte wässerige 



*) Zur Darstellung des ^'g m. primären Phosphats versetzt man IQOcm^ 1 molare 

 (3fach normale) Phosphorsäure mit lOQcm^ n-NaOH und 100 cw^ destilliertem Wasser; 

 zur Darstellung des V'g m. sekundären Phosphats werden 100 cw^ 1 molar Phosphorsäure 

 mit 200 c/«^ n-NaOH versetzt. (Vgl. Michaelis, Arbeitsmethoden. Bd. 3. S. 1337.) 



^) P. Bona und Z. Bien, Zur Kenntnis der Esterase des Blutes. V. Biochem. 

 Zeitschr. Bd. 59. S. 100 (1914). 



