Anwendung von Adsorption und Kapillarität zur biochemischen Analyse. ]01 



Wird eine Chlorophyllösung durch eine Säule eines Adsorptions- 

 mittels durchgeschickt (am besten verwendet man im Trockenschrank ge- 

 trocknetes CaCÖ 3 , das in Filterröhrchen möglichst gleichmäßig festgestampft 

 wird, wie man sie bei der gravimetrischen Zuckerbestimmung verwendet), 

 so werden die Farbstoffe gemäß der Adsorptionsreihe von oben nach 

 unten in verschieden gefärbten Zonen auseinandergelegt, indem die stärker 

 adsorbierten Farbstoffe die anderen weiter nach unten verdrängen, die 

 weniger intensiv zurückgehalten werden. Die Zonen grenzen sich viel 

 Schürfer gegeneinander ab. wenn man nach beendeter Filtration einen 

 Strom des reinen Lösungsmittels durch den Adsorbator gehen läßt. Die 

 Komponenten eines Farbstoffgemisches werden dergestalt auseinandergelegt 

 und lassen sich nachher qualitativ und quantitativ bestimmen. Ein solches 

 Präparat heißt Chromatogramm und die Methode die chromatogra- 

 phische. Außer Petroläther eignet sich auch Benzol, Xylol. Toluol und be- 

 sonders Schwefelkohlenstoff als Lösungsmittel. Außer Chlorophyllösungen 

 wurden chromatographisch schon Lezithin, Alkannin, Prodigiosin, Sudan, 

 Cyanin, Solanorubin untersucht. 



Sehr wichtig ist, daß das Lösungsmittel, nicht mit Wasser, Alkohol 

 u.dgl. verunreinigt sei. Nehmen wir das Beispiel des Chlorophylls, so löst sich 

 dieses Farbstoffgemisch wohl in Alkohol oder Äther mit tiefgrüner Farbe. 

 Petroläther, Schwefelkohlenstoff etc. aber liefern immer mehr oder weniger 

 gelbliche Extrakte. Wenn aber das Blattmaterial vorher mit Alkohol durch- 

 tränkt wurde, liefern auch die oben genannten Lösungsmittel sattgrüne 

 Auszüge. Der Petroläther soll etwa 10"/,, Alkohol enthalten. Nun wird die 

 grüne Lösung mehrmals mit dem doppelten Volumen Wasser im Scheide- 

 trichter unter fortwährendem Umschütteln ausgewaschen. Der Alkohol geht 

 vollständig ins Wasser und wird aus dem Petroläther so entfernt. Nach- 

 dem eine Trocknung des Extraktes über CaCL vorgenommen wurde, fil- 

 triert man über dem Adsorbator, wobei man das Chromatogramm erhält. 

 während Karotin als gelbe (aus Schwefelkohlenstoff als rosa gefärbte) 

 Lösung durchgeht. 



Die mit dem Manometer M (Fig. 12) versehene Dreiliterflasche B 

 dient als Druckreservoir, in welchem durch die Piöhre D mittelst der 

 Gummibirne P ein gewisser Luftdruck hergestellt werden kann. P ist 

 mittelst des Quetschhahnes Q von dem Rest des Apparates luftdicht ab- 

 schließbar. Die Piöhre D dient als Druckverteiler; sie ist mit einer Anzahl 

 röhrenförmiger Ansätze versehen, an welche die eigentlichen Filtrations- 

 vorrichtungen zu befestigen sind. Diese bestehen aus zylindrischen Filter- 

 röhrchen, wie sie bei der gravimetrischen Zuckerbestimmung angewendet 

 werden und laufen wie diese in einen schmäleren Teil aus. Ein ausge- 

 bauchtes Filtrationsreservoir dazu zu verwenden, wie es Tswett tut. hat 

 sich bei meinen Untersuchungen wegen des schweren Hinausschiebens des 

 Adsorbates zwecks Analyse der einzelnen Farbstoffkomponenten als weniger 

 zweckmäßig erwiesen. Das Filtrationstrichterchen wird mit dem Druckver- 

 teiler D mittelst eines festschließenden Pfropfens in Verbindung gesetzt. 



