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Es gelingt ferner, aus dem Extrakt mit Tierkohle den Farbstoff 

 gänzlich herauszunehmen , wodurch eine völlig farblose Lösung hergestellt 

 wird, in der mit Guajak und Wasserstoffsuperoxyd eine wenn auch schwache 

 Bläuung eintritt. 



Teilweise gehen die Enzyme in die Kohle über, und aus derselben 

 lassen sie sich gleichzeitig mit dem Farbstoff durch verdünnte Natron- 

 lauge wieder ausziehen. 



Wird dieser Extrakt im Wasserring kapillarisiert , so läßt sich ein 

 Feld erhalten . in welchem das oxydierende Enzym aufgefunden werden 

 kann. Das Chromogramm zeigt nun im Vergleich zu dem vorhergehenden 

 mehr Farbstoff und weniger Enzym an. Daraus folgt, daß die Essigsäure 

 nicht etwa spaltend auf eine chemische Verbindung, auf eine Oxydase, 

 einwirkt. Das Enzym ist in diesem Falle mit seinem Substrat durch Ad- 

 sorption so verbunden, daß beide durch einfache Kapillarisation nicht ge- 

 trennt werden können. 



Die Tennung gelingt schließlich durch wiederholte feuchte Kapillari- 

 sation; doch ist dieses Verfahren immerhin umständlich. 



Mikroskopische Schnitte geben mit der Violamin- resp. mit der 

 Guajakwavscjstotfsuperoxydreaktion nicht immer das gleiche Bild. Das ge- 

 bildete Violett resp. Blau wird teilweise wieder reduziert und dadurch miß- 

 farbig. Diese Veränderung kann auch an dem braunen Farbstoff selbst 

 beobachtet werden: sie hängt ab von dem Vorherrschen des oxydierenden 

 Enzyms oder der erwähnten Antioxydase. 



Daß die im Gewebe vorhandenen Farbstoffe dieser Veränderung leicht 

 unterliegen, kann auf folgende Weise demonstriert werden: Läßt man den 

 alkalischen Pflanzenextrakt teilweise unter Wasserstoff und an der Luft 

 stehen, so wird intermediär ein roter Farbstoff gebildet, welchen man 

 kapillaranalytisch leicht von dem braunen trennen kann. 



Fällt man dieses Farbstoffgemisch mit Essigsäure und löst den aus- 

 gewaschenen Niederschlag wieder mit Kalilauge auf, so erhält man eine 

 rotbraune Lösung, in der man durch Sauerstoff in stat. nasc. — z. B. durch 

 H 2 2 + Ba0 2 — die Farbstoffe völlig oxydieren und in eine gelb gefärbte 

 Verbindung überführen kann. Durch Wasserstoff in stat. nasc. werden die 

 dunklen Farbstoffe gänzlich in die Leukoverbindung verwandelt : zu dieser 

 Verwandlung kann man Xatriumamalgam verwenden. 



Das Chromogramm mit den diese Umwandlungen bewirkenden En- 

 zymen läßt sich auch so herstellen, daß die violette Oxydasefärbung die 

 Mitte einnimmt, welche dann von einer hellen Entfärbungszone umringt 

 i>T: die Grenzlinie wird von den Farbstoffen gebildet. Diese Darstellung 

 beruht darauf, daß man die Versuchslösung fortgesetzt und mit Unter- 

 brechungen auf die Mitte aufträufeln, und wenn das Feld genügend an- 

 gereichert ist. Wassertropfen nachfolgen läßt, wodurch hauptsächlich Anti- 

 oxydase nach außen gespült wird, während die Oxydase mehr zurückbleibt 



