Spektrographische Methoden zur Bestimmung des Hämoglobins etc. 401 



etwa 5 cm langes Spektrogramm. (Das Spektrum zweiter Ordnung läßt 

 sich wegen seiner geringeren Reinheit für unsere Zwecke nicht gut 

 verwenden.) Diese Länge genügt vollständig, um die mikrometrische Aus- 

 messung der den Absorptionsstreifen entsprechenden Bezirke der Spek- 

 trogramme in befriedigender Weise ausführen zu können. Bei wesentlich 

 größerer Länge würden die Absorptionsstreifen vieler Farbstoffe nicht 

 mehr mit der für die mikrometrische Ortsbestimmung erforderlichen 

 Schärfe darstellbar sein. Die bezeichnete Kombination (Gitter von zirka 

 14.500 Furchen und Objektive von zirka 25 cm Brennweite) ist auch in- 

 sofern besonders empfehlenswert, als damit verhältnismäßig gut Spektro- 

 gramme hergestellt werden können, bei denen die durch die Plattenmi- 

 ninia 1 ) bedingten Ungenauigkeiten nicht so sehr bemerkbar sind. Auch 

 sind diese Gitter verhältnismäßig leicht in guter Qualität zu beschaffen, 

 während die Gitter von wesentlich geringerer Furchenzahl nach meinen 

 Erfahrungen nicht so leicht in gleichmäßiger Güte erhältlich sind. Z. B. 

 habe ich verschiedentlich Gitter von 7200 Furchen pro engl. Zoll ge- 

 troffen, die auffälligerweise lichtschwächer waren als Gitter von 14.500 

 Furchen und auch sonst kein normales Verhalten zeigten. 2 ) 



Um schwache und verwaschene Absorptionsstreifen spektrographisch 

 schärfer darzustellen, benutzt man statt des Objektivs von 25 cm Brenn- 

 weite solche von Brennweiten zwischen 12 und 20 cm iz. B. von 15 cm) 

 oder man behält das Objektiv von 25 cm Brennweite bei und wechselt 

 das (Titter von 14.500 Furchen gegen ein gutes Gitter von zirka 7200 

 Furchen aus. Man erhält im letzteren Falle mit dem Spektrum erster 

 Ordnung ein von pw. 700 bis (xtt 350 etwa 2 1 , cm langes Spektro- 

 gramm. 



Die durch die „Plattenminima" bedingten Mängel der Spektro- 

 gramme treten um so stärker auf, je geringer die Dispersion des Gitters 

 und demnach die Länge des Spektrums ist. Deshalb sind bei einer Ob- 

 jektivbrennweite von zirka 2b bis 30 cm mit einem Gitter von 3600 

 Furtdien pro engl. Zoll nur schwielig gute Spektrogramme herzustellen, 

 so daß eine solche Kombination vorteilhaft nur zur spektrographi sehen 

 Darstellung von Absorptionsstreifen benutzt wird, die in den durch die 

 ..Plattenminima" nicht beeinträchtigten Bezirken auftreten. Ob die Ver- 

 wendung einer Kombination des Gitters von 3600 Furchen pro Zoll mit 

 einem Teleobjektiv gegenüber der oben empfohlenen Kombination (Gitter 

 14.500 und Objektiv 25 cm) Vorteile bietet, ist zweifelhaft. Als objektive 

 benutze ich durchweg Glasachromate mit einem Öffnungsverhältnis von 1 : 8, 

 die mir in sehr guter Beschaffenheit von Carl Zeiß, Jena, geliefert worden 

 sind. Auch die von G. Ä. Steinheil Söhne (München) bezogenen drei- 



) Vgl. auch die Abschnitte: „Die photographischen Platten" und ..Die Ausfüh- 

 rung einer spektrographischen Untersuchung". 



2 ) Eine orientierende Prüfung der Gitter auf ihre verschiedene Lichtstärke läßt 

 sich sehr bequem an einem mit Spektralspalt ausgestatteten Projektionsapparat aus- 

 führen. 



Abderhalden. Handbuch der biochemischen Arbeitsmethoden. VI. 26 



