Über Anwendung der photograph. Methode in der Spektrophotometrie etc. 449 



längen in dem untersuchten Spektruni, ausgedrückt in Längeneinheiten 

 des Maßstabs — nachdem man nur einmal ein bekanntes Linienspektrum 

 in dem gleichen Spektrographen aufgenommen und dessen Linien in ihrer 

 Beziehung zu der Marke am Mikrophotometer ausgemessen hat. 



Nun stellt man die für die unternommene Untersuchung wichtigen 

 Stellen in jedem der beiden Parallelspektren ein, jede Entfernung von der 

 Marke (auf Ol mm genau) also in beiden Spektren. Bei jeder Einstellung 

 liest man die „Schwärzung" ab, nachdem man durch Verschieben des 

 „Keils- das ganze Gesichtsfeld auf gleiche Helligkeit gebracht hat. Natür- 

 lich empfiehlt es sich, jede Messung mindestens einmal zu wiederholen, 

 und zwar am besten nicht direkt hinterher, damit die momentanen Adap- 

 tions- und Ermüdungsverhältnisse des Auges bei der Mittelzahl weniger 

 ins Gewicht fallen. Je nach der Genauigkeit, die man zu erzielen wünscht, 

 begnügt man sich mit 2 oder 4 Messungen der gleichen Stelle. Häufigere 

 Wiederholung pflegt das Resultat nur noch unwesentlich zu verbessern. 

 Strebt man größte erreichbare Genauigkeit an, so ist statt einer allzu 

 häufigen Wiederholung der Messung an einer und derselben Stelle eher 

 eine Vervollständigung durch Messung an dicht benachbarten Stellen des 

 Spektrums anzuraten, weil zuweilen kleine Fehler der Platte vorhanden 

 sind, d. h. einzelne Stellen, in denen das Silber nicht in der gleichen "Weise 

 verteilt ist wie sonst. Hat man gerade eine solche Stelle für die Messung 

 getroffen und beschränkt sich auf sie allein, so erhält man natürlich ver- 

 kehrte Resultate. 



Der Ausschnitt aus dem Spektrum, der im Gesichtsfeld des Mikro- 

 photometers zur Messung gebracht werden kann, ist außerordentlich schmal; 

 die L T nterschiede der Wellenlängen an seinen Ptändern betrugen z. B. bei 

 einer Längsausdehnung des ganzen Spektrogramms (ca. 360- -680 y.y.) von 

 rund 10 cm nur 0*35 [/.[/.. Legt man selbst 10 solcher Ausschnitte aneinander, 

 so erhält man noch immer einen wesentlich schmäleren Spektralbezirk, als 

 ihn etwa Hüfners Spektrophotometer anzuwenden vermag (11 — 8'5 \>.\>. 

 Unterschied der Wellenlängen). 



Zur Ermittlung des konstanten Faktors für das zur Abschwächung 

 ih^ weißen Lichtes dienende, die eine Spalthälfte des Spektrographen be- 

 deckende Absorptionsglas *) mißt man in dem entsprechenden Doppel- 

 spektrogramm eine größere Zahl von Schwärzungswerten, etwa an 5 ver- 

 schiedenen, über das zu untersuchende Spektralgebiet gleichmäßig ver- 

 teilten Stellen und an jeder einzelnen viermal. Von den 2mal 5 Mittel- 

 werten sucht man in der Schwärzungskurve die korrespondierenden 

 Helligkeitslogarithmen auf; die Differenz jedes Wertepaares liefert fünf 

 Logarithmen für das durch das Absorptionsglas ausgelöschte Licht : zeigen 

 diese Zahlen keinen Gang mit der Wellenlänge, sondern stimmen innerhall) 

 der Beobachtungsgenauigkeit überein. so stellt das Mittel den endgültigen 

 Koirektionswert dar, der jedem Helligkeitslogarithmus, der sich aus einer 



l ) Vgl. S. 438/39, 444, 445. 



Abderhalden. Handbuch der biochemischen Arbeitsmethoden. VI. 29 



