Ergänzungen zu den Methoden zur Untersuchung der Verdauungsprodukte. ,"»11 



Kontrolle durch Blindversuche. 1 ) Unter diesen Bedingungen kann man 

 aber nach Abderhalden und ffanslian 2 ) Monoaminosäuren neben Polypep- 

 tiden mit Sicherheit nachweisen. 



Kober 3 ) hat nachgewiesen, daß fast alle Aminosäuren Kupfersalze 

 bilden, welche durch Sieden mit einem geringen Alkaliüberschusse ihr 

 Kupfer als Kupferhydrat abgeben. Vielleicht besitzen sogar alle Amino- 

 säuren diese Eigenschaft. Die meisten kupfersalzbildenden Polypeptide 

 geben hingegen unter diesen Bedingungen keineswegs ihr Kupiersalz als 

 Hydrat ab. Dies ist auch der Fall für die Peptone, welche außerdem mehr 

 Kupferhydrat bei Alkaligegenwart als sonst auflösen. 



Demnach kann man den Spaltungsgrad der Polypeptide auf folgende 

 Weise annähernd schätzen. Ein Teil der neutralen oder kaum alkalischen 

 Verdauungsflüssigkeit wird einige Minuten mit einem Überschüsse von 

 Kupferkarbonat oder frisch gefälltem Kupferhydrat zum Sieden erhitzt. 

 Bei nicht zu verdünnter Lösung genügen ungefähr 15 Minuten zur völligen 

 Bildung der Kupfersalze. Nun filtriert man den Kupferhydratüberschuß 

 ab. Das Filtrat wird zum Sieden erhitzt und dann mit 5 — 10 cm % dezi- 

 normaler Alkalilösung versetzt. Bei Aminosäurenanwesenheit entsteht ein 

 Kupferniederschlag. Falls nach einigen Minuten bei weiterem Sieden kein 

 Niederschlag erscheint, so sind keine freien Aminosäuren in der Ver- 

 dauungsflüssigkeit vorhanden. Man muß stets einen Kontrollversuch aus- 

 führen, bei welchem die Verdauungsflüssigkeit durch die gleiche Menge 

 destillierten Wassers ersetzt wird, um sich zu vergewissern, daß sich kein 

 Kupferhydratniederschlag ohne Aminosäurenanwesenheit bildet. 



Falls eine durch den roten Kupferoxydniederschlag angezeigte Re- 

 duktion erfolgt, so wird die Lösung vom reduzierten Kupferoxyde durch 

 Filtration befreit, neutralisiert und darauf das neue Filtrat mit Kupfer- 

 hydmt versetzt. Man muß alle reduzierenden Stoffe auf diese Weise oxy- 

 dieren vor der schließlichen Behandlung mit Kupferhydrate. Eine geringe 

 Ammoniakmenge stört die Reaktion nicht. Eine erhebliche Ammoniak- 

 menge läßt sich beim Sieden nach der Bildung der Kupfersalze der Poly- 

 peptide und der Aminosäuren wegtreiben. 



Um die Aminosäuren nach dem Verfahren von Neuberg und Kerb*) 

 zu fällen, bedient man sich einer 25%igen Merkuriazetatlösung und einer 



) E.Abderhalden, W. K/i/a/i iinnoi und 77/. Pappenhusen, Zur Kenntnis des Ab- 

 baus der Eiweißkörper im Magendarm kanal verschiedener Tierarten. Zeitschr. f. physiol. 

 Chemie. Bd. 71. S. 411— 420 (1911). - B. 0. Pribram , Über die Anwendbarkeit der 

 Estermethode Ihm Stoffwechselvers nchen. Ibid. Bd. 71. S. 472— 478 (1911). 



-) E. Abderhalden und R. Hanslian, Über die Verwendbarkeit der Estermethode 

 zum Nachweis von Monoaminosäuren neben Polypeptiden. Zeitschr. f. physiol. Chemie. 

 Bd. 77. S.285— 288 (1912). — E. Abderhalden, Über .las Schicksal der Eiweißabbau- 

 produkte im Darmkaual. Ibid. Bd. 78. S. 382— 395 (1912). 



i /'. .1. Kober , A method for the study of proteolytic ferments. Journ. of biol. 

 Chem. Vol. 10. p. 9—14 (1911). 



4 ) C. Neuberg und ./. Kerb, Über ein Fällungsmittel für Aminosäuren. Biochem. 

 Zeitschr. Bd. 40. S. 498— 512 (19121. 



