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färbt sich dabei dunkelrot. Die abgekühlte Flüssigkeit wird mit Chloroform 

 ausgeschüttelt. Man läßt nun das Chloroformextrakt einige Minuten ruhig 

 stehen, danach wird die Lösung vorsichtig abgegossen, das Chloroform, 

 verdunstet und der Rückstand 2 Stunden bei 110" getrocknet. Um das 

 überschüssige Isatin zu entfernen, muß der Chloroformrückstand mit heißem 

 Wasser, worin das Isatin leicht löslich ist, ausziehen, bis die abgegossene 

 Flüssigkeit nicht mehr reduziert. Nach dieser Reinigung wird das trockene 

 Residuum mit Schwefelsäure versetzt und als Indigorotdisulfosäure mit 

 Permanganat titriert. 



Die Titrierflüssigkeiten müssen ganz klar sein. Beim eventuell nötigen 

 Filtrieren ist ein aliquoter Teil zu untersuchen; man filtriert durch einen 

 kleinen Filter und verwirft die ersten 20 — oO crn^ des Filtrates. Wenn sich 

 gegen Ende der Titration äußerst fein verteiltes Mangandioxyd in der 

 Flüssigkeit abscheidet, soll man dann und wann während der Titration 

 ein wenig starke Hg SO4 zu der Flüssigkeit hinzufügen. 



Die Einstellung der Permanganatlösung erfolgt mit reinem Indigorot 

 in Lösung. Das käufüche Indigorot wird in Chloroform gelöst, das Chloro- 

 form verdampft, das Indigorot in Äther aufgenommen, der Rückstand vom 

 Äther getrocknet, 5 — 10 mg genau abgewogen, in konzentrierter Schwefel- 

 säure gelöst und mit Permanganat titriert. 



Bei sehr indikanreichem Harn ist es besser, das Filtrat des mit 

 Bleiessig gefällten Harns mit Wasser zu verdünnen. Um den ungefähren 

 Gehalt des Harns an Indikan kennen zu lernen, kocht man gleiche Volu- 

 mina Harn und Reagens und schüttelt mit Chloroform aus. Beim Ge- 

 brauch von 5 c)u^ Harn mit 5 cm'^ Reagens und 2 ciii^ Chloroform färbt 

 sich letzteres bei indikanarmem Harn leicht rosarot, bei leichter Indikanurie 

 schön purpurrot, bei indikanreichem Harn dunkel weinrot. 



Bei der Bestimmung entspricht die Hälfte vom gefundenen Werte dem 

 Harnindigo, da die Hälfte des Indigomoleküls vom Isatin geliefert wird. 



Zur schnellen Bestimmung des Indikans dient das Indikanurometer von 

 Bouma. Dieses besteht aus 11 in einer Reihe geordneten Reagenzröhrchen 

 von gleichem Durchmesser und gleicher Wanddicke. Sechs dieser Röhrchen 

 enthalten eine Lösung von aus Harn bereitetem Indigorot in Chloroform 

 von verschiedener Stärke, welche der Reihe nach übereinstimmt mit einem 

 Gehalte des Harns an Indigo von 5, 10, 15, 20, 30, 40 w^ pro Liter. 



Diese Röhrchen sind auf folgende Weise angefertigt: 



Möglichst reines aus Harn dargestelltes Indigorot wird in Chloro- 

 form gelöst, ^'on einem Teil dieser Lösung wird das Chloroform ver- 

 dunstet und der Gehalt an Indigo mittelst Titration mit Chamaeleon, welches 

 auf reines synthetisches Indigorot gestellt ist, bestimmt, ^'om anderen 

 Teil der Lösung des Indigorots werden durch geeignete Verdünnung Flüssig- 

 keiten bereitet, Avelche der Reihe nach 10, 20, oO, 40, 60 und 80 mg Indigo 

 enthalten auf 1 / Chloroform. Diese Flüssigkeiten werden als Standardlösungen 

 gebraucht und kolorimetrisch verglichen. Die Röhrchen werden zuge- 

 schmolzen und im Dunkeln aufbewahrt. 20 cm^ Harn werden mit i/io 



