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mit Ligroin, zieht den Rückstand mit Alkohol aus, filtriert und fügt p-Di- 

 methylaminobenzaldehyd (2''/oige Lösung in 20% Salzsäure) hinzu. Die Lösung 

 färbt sich sofort oder erst nach dem Kochen schön rot; spektroskopisch sieht 

 man einen Streifen in Orange. 



Bei der quantitativen Bestimmung des Urobilins verfährt man nach 

 G. Hoppe- Sei/ler^) wie folgt : 



100 cm'* Urin werden mit verdünnter H^SO^ angesäuert, mit Ammonsulfat gesättigt. 

 Nach öfterem Umrühren und mehrstündigem Stehenlassen ausgeschiedene rote Flocken 

 werden aufs Filter gebracht, mit konzentrierter Lösung von Ammonsulfat gewaschen, 

 das Filter mit gleichen Teilen Alkohol und Chloroform in einem Kolben extrahiert. Diese 

 Extrakte werden im Scheidetrichter mit Wasser versetzt, bis das Chloroform sich gut 

 abscheidet und stehen gelassen, bis dieses ganz klar ist. Die Chloroformlösung wird dann 

 durch ein kleines Filter filtriert, in gewogenem Becherglas auf dem Wasserbad langsam 

 verdunstet, der Rückstand bei 100° getrocknet, mit etwas Äther extrahiert, filtriert, der 

 Filterrückstand mit Alkohol wieder gelöst, wieder ins Becherglas gebracht, eingedampft, 

 getrocknet, gewogen. 



Um das Urobilin neben Urobilinogen nachzuweisen, wird nach 

 Saillet^) 100 cm^ frisch gelassener, im Dunkeln gehaltener Harn mit 

 10 Tropfen Eisessig versetzt und mit dem gleichen Volumen Essigäther 

 ausgeschüttelt. Der Essigäther wird mit wenig Wasser, das das vorhandene 

 Urobilin aufnimmt, geschüttelt, das vorhandene Urobilinogen durch Stehen- 

 lassen der Essigätherlösung im SonnenKchte in Urobihn übergeführt und 

 dieses wieder nach Zusatz von etwas Essigsäure in Wasser aufgenommen. 



In neuerer Zeit hat D. Charnas'^) eine Methode zur Darstellung und 

 quantitativen Bestimmung des Urobilins und Urobilinogens angegeben, 

 die an Exaktheit die früheren überragen dürfte. Das Prinzip der Methode 

 ist das folgende : Der urobilinhaltige Harn wird vergoren, angesäuert, aus- 

 geäthert, die Urobilinogenlösung, wenn nötig, durch Petroläther von bei- 

 gemengtem Farbstoff befreit. Dann wird das UrobiUnogen entweder 

 direkt mit Hilfe der Ehrlichschen Reaktion quantitativ bestimmt oder 

 durch Belichtung in Urobilin übergeführt, dieses durch Aussalzen gereinigt 

 und zur Wägung gebracht. Die genauen Vorschriften sind die folgenden: 

 500 oder 1000 cm^ des urobilinhaltigen fri sehen Harnes werden bis zum 

 Eintritt der alkalischen Reaktion mit Ammoniumkarbonatlösung versetzt 

 und 1 — 2 Tage lang im Brutofen belassen. Dann wird der Harn in einem 

 sehr geräumigen, offenen Gefäße durch Zusatz einer gesättigten Weinsäure- 

 lösung stark sauer gemacht, ein etwa ausfallender Niederschlag schnell 

 abgesaugt und die Flüssigkeit mit dem V/^- bis 2fachen Volumen Äther 

 ausgeschüttelt. Die Ätherschicht wird wiederholt mit einem kleinen Volumen 

 Wasser gewaschen. Ist diese stark gefärbt, so wird das gleiche Volumen 



*) G. Hoppe-Seyler, Über die Ausscheidung des Urobilins in Krankheiten. Virchows 

 Arch. Bd. 124. S. 30 (1891). 



-) 1. c. nach Spaeth, Chemische und mikroskopische Untersuchungen des Harnes. 

 3. Aufl. 1908. S. 465. 



^) D. Charnas, Über die Darstellung, das Verhalten und die quantitative Bestim- 

 mung des reinen Urobilins und des Urobilinogens. Biochem. Zeitschr. Bd. 20. S. 401 (1909)- 



