1190 Leouor Michaelis. 



geteilt, auf Ausblasen geaicht. Man fülle in eine Reihe von Reagenzgläsern 

 je 0*5 cm 3 Pferdeserum ein, und zwar unverdünnt, V2 verdünnt, 1/4 ver- 

 dünnt usw. ]Man macht das am besten in folgender Weise. Man fügt aus 

 einer größeren , 10 cm^ fassenden Pipette in alle Reagenzgläser mit Aus- 

 nahme der ersten 0"5 cm^ einer 0-85Voigen CINa-Lösung. Dann nimmt man 

 1 cm3 Pferdeserum in eine 1 cm^ fassende Pipette, läßt davon ^/^_cm^ in 

 das erste Glas, 1/2 cm^ in das zweite. Man mischt das zweite durch wieder- 

 holtes Auf- und Abziehen der Flüssigkeit gut durch und entnimmt dann 

 mit derselben Pipette V2 cm^ und bringt sie in das dritte Glas; hier mischt 

 man mit derselben Pipette ebenso und verfährt so weiter. 



Will man größere Abstände zwischen den Gläsern machen, so mache 

 man in entsprechender Weise die Verdünnungen 1 : 10, 1 : 100, 1 : 1000 usw. 

 bis 1 : 1,000.000. In allen Röhrchen muß das Volumen zum Schluß gleich 

 sein. Sodann gibt man mit einer neuen Pipette in jedes der Röhrchen 

 0*2 cm'^ des Präzipitinserums hinzu und wartet ab. Erwärmung im Brut- 

 schrank beschleunigt die Reaktion. Es entsteht dann eine Trübung, die 

 sich im Laufe von einer Stunde oder später zu einem Niederschlag zu- 

 sammenballt. Wenn man nach 1 stündigem Aufenthalt im Brutschrank die 

 Röhrchen ins Zimmer stellt, so tritt bei der Abkühlung die Präzipitation 

 oft plötzlich ein. Der Niederschlag ist nicht am stärksten da. wo am meisten 

 Pferdeserum zugegeben ist, sondern in einer der mittleren Verdünnungen, 

 weil ein Überschuß der präzipitablen Substanz die Niederschlagsbildung hemmt. 

 Mitunter sind die präzipitablen Substanzen so trübe, daß mau direkt 

 die Präzipitinreaktion nicht vornehmen kann, welche natürlich völlige Klar- 

 heit der Reagenzien verlangt. Man habe z. B. die Aufgabe, in einem Extrakt 

 aus einem Organ oder einer Wurst Pferdeserumeiweiß nachzuweisen. Es 

 sind für die pohzeiliche und forensische Anwendung für diesen Zweck ver- 

 schiedene Verfahren angegeben worden, ich glaube aber, daß man für 

 physiologische Zwecke mit folgender Methode immer auskommen wird. Das 

 Organ (oder die Wurst) ^^1rd zuerst grob zerschnitten, dann im ^Mörser 

 zerkleinert, so wie es ohne Anwendung besonderer Mittel möghch ist, dann 

 einige Stunden im Schüttelapparat extrahiert mit der lOfachen Menge einer 

 wässerigen Lösung von V/^ Gl Na und 0*5 Vo Phenol. Dann lasse mau das 

 Gemisch einen Tag auf Eis stehen. Darauf läßt es sich durch wiederholtes 

 Aufgießen auf ein und dasselbe Filter gewöhnlich leicht in genügender 

 Menge klar filtrieren. Man prüfe das Filtrat darauf, ob es überhaupt Eiweiß 

 gelöst enthält. Bei einem Gehalt von weniger als l%o an Eiweiß ist es 

 für die Präzipitinreaktion schon gut brauchbar. Man nehme dann ebenso 

 me oben etwa 0*5 cm^ des Extraktes und 0-2 cm^ des Präzipitins. Ist der 

 Extrakt sehr reich an Eiweiß, so tut man gut, ebenso wie oben, die Probe 

 mit abfallenden Verdünnungen anzustehen, weil möglicherweise die unver- 

 dünnte Lösung soviel Eiweiß enthalten könnte, daß die optimale Reaktion 

 schon überschritten ist. Fremdes, mit dem Präzipitin nicht reagierendes 

 Eiweiß hemmt selbst im Überschuß die eigenthche Präzipitinreaktion nicht 

 oder kaum. 



