Die wichtigsten Methoden der Immunitätsforschung. 1193 



Ein Meorschweinchci» wird (hiich oinen langen Schnitt mit dem Rasier- 

 messer am Halse ^'etötct und das heranssprit/endc Uliit durch einen ^rülieren 

 Trichter in ein Zentrifui;iergefäl» aufgefangen. Nachdem das Blut voll- 

 kommen geronnen ist, wird es, wie ohen beschrieben, von der Wand des 

 Glases abgelöst und stark zentrifugiert. Nach einer Viertelstunde kann 

 man das klare Serum mit einer Pipette mit (iummihütclicn unter Kontrolle 

 des Auges absaugen. Von einem mittleren Meerschweinchen gewinnt man 

 etwa 6 — 10 nu^ Serum. 



Der Komplementgehalt des frischen Serums nimmt bei Zimmer- 

 temperatur schon in einem Tage stark ab, weniger im gut gekühlten Eis- 

 schrank. Verlärdich konstant bleibt der Komplementgehalt für mehrere Tage 

 nur i)eim P^iufrieren. 



Zur Prüfung des Hämolysins stelle man sich die oben beschriebene 

 ö^/oige Blutkörperchenaufschwemmung her. 



Der Nachweis des Hämolysins. 



Man fülle in gewöhnliche große Reagenzgläser je Icm^ der 5"/oigen 

 Blutaufschwemmung und je 1 cm^ des zehnfach verdünnten Komplementes, 

 femer je 1 cm^ verschiedener Verdünnungen des inaktivierten Hämolysins 

 (des ,,Ambozeptor" oder „Sensibisator"). Als geeignete Verdünnungen nehme 

 man z.B. Vio, Vso, Vioo, Vsoo, \^ooo- ^ cm^ hiervon entspricht also O'l, 

 0-03, 0-01, 0003, 0001 cm» Serum. 



Nach guter Durchmischung werden die Röhrchen in ein W^asserbad 

 oder in den Brutschrank von 37'' gebracht, nach zwei Stunden nehme man 

 sie heraus und bewahre sie im Eisschrank bis zum nächsten Tag auf. 

 In den ersten Röhrchen wird die Hämolyse schon nach einigen Minuten 

 bis nach 2 Stunden komplett sein, d. h. die Flüssigkeit ist lackfarben 

 ohne jedes Sediment , in den mittleren Röhrchen ist die Flüssigkeit weniger 

 gerötet und die Kuppe des Reagenzglases ist am nächsten Tage von 

 einem Sediment roter Blutkörperchen bedeckt. In den letzten Röhrchen 

 ist die Flüssigkeit farblos und die Blutkörperchen liegen intakt auf dem 

 Boden des Glases. Wenn man auf die Beobachtung des Sediments verzichten 

 will, kann man das gleiche Resultat sofort nach 2stündigem Aufenthalt im 

 Brutschrank bekommen; die undurchsichtige Blutkörperchenaufschwemmung 

 wird lackfarben. I^nter der einfach lösUchen Dosis des Ambozeptors ver- 

 steht man diejenige Menge, welche bei dieser Versuchsanordnung gerade 

 eben vollkommene Hämolyse hervorruft. Nach obigem Vorversuch mu() sie 

 durch eingeschaltete Zwischenglieder näher präzisiert werden. Ein guter 

 Ambozeptor kann nicht selten eine lösende Dosis von weit weniger als 

 0-001 rm» haben. 



Die hiermit bestimmte lösende Dosis bezieht sich auf die gleichzeitige 

 Wirkung von Ol cm^ Komplement. Im allgemeinen gilt aber die Regel: je 

 mehr Komplement, um so kleiner ist die lösende Dosis des Ambozeptors, 

 je mehr Aml)Ozeptor, um so kleiner ist die lösende Dosis des Komplements. 

 Es besteht aber keine Proportionahtät in dieser Beziehung. 



