Die wichtigsten Methoden beim Arheitoii mit ]'ilz(Mi und Bakterien. ] 259 



zugesetzt, gut geschüttelt uiul «lif Kultur duicli ciu rorzollanfiltor filtriert. 

 Das Ultrat wird weiter nach der Jilunirnt/idhi'hi'u Methode der Lahjjepsin- 

 trennuug behandelt. Dementsprechend wird dasselbe mit ()l"/oiger Schwefel- 

 säure schwach augesäuert und mit einem Cberschuß von Kochsalz ver- 

 setzt, so daß ein ungelöster Sal/rückstand verbleibt. Es scheidet sich an 

 der Oberfläche ein schneeweiüer Schaum ab, der ein verhiltuismäüig reines 

 Lab darstellt. Dieses wird in Wasser gelöst und durch Dialyse salzfrei ge- 

 macht. Die Labwirkung prüft man auf Milch oder Kaseinlösungen mit ge- 

 ringem Kalkzusatz. 



2. Kohlenhydratspaltende Enzyme. Diese werden in Lösungen 

 oder in Kulturen entweder mit der Diffusionsmethode nach Wysnmnn 

 oder mittelst der Auxanographie Beijerincks nachgewiesen. 



Diffusionsmethode Wysmanns'^): Da hier nicht lebende Organismen 

 das Reagens sind, kann bei dieser Methode mit desinfizierten P^nzym- 

 lösungen gearbeitet werden. Gelatineplatten werden mit dem zu unter- 

 suchenden Kohlenhydrat durchsetzt und mit einem Tröpfchen der Enzym- 

 lösung beschickt. Aus dem Tröpfchen diffundiert das Enzym in die Gela- 

 tineplatte und bewirkt in dem darin gelösten oder suspendierten Kohlen- 

 hydrat die Veränderungen. Wird nachher die Platte mit einem Reagens 

 Übergossen, das Farbenreaktionen mit dem ursprünglichen oder mit den 

 entstandenen Produkten ausKist, so treten besonders gefärbte Diffusions- 

 felder auf. War beispielsweise in der Platte Stärke suspendiert und wurde 

 Amylaselösung aufgetropft, so wird nach einiger Zeit durch aufgegossene 

 Jodlösung die unveränderte Stärke mit Blaufärbung reagieren, die Platte 

 also überall dort, wo keine Veränderung der Stärke statthatte, blau sein, 

 während die Gelatine um den Amylasetropfen farblos bleibt. Bei der Bildung 

 sich anders färbender Spaltungsprodukte werden Mischfarben entstehen, 

 die zonenartig den Ausgangspunkt der Enzymwirkung umgeben. 



Bei der Untersuchung der bakteriellen kohlenhydratspaltenden Enzyme 

 können die angeführten Methoden mit geringen Modifikationen mit Vorteil 

 angewendet werden. 



Auxanographie 2): Empfindliche, qualitative Reagenzien auf eine 

 Reihe von Spaltungsprodukten der enzymatischen Kohlenhydratzerlegung 

 sind gewisse niedere Organismen selbst. So vermögen bestimmte Hefearten 

 nur dann sich zu entwickeln, wenn ganz bestimmte Zuckerarten vorhanden 

 sind,,während mit anderen Kohlenhydraten jedes Wachstum unterbleibt. Diese 

 beiMikroorganismen weitverbreitete auswählende Fähigkeit benutzte Beijennck 

 zur Ausarbeitung der auxanographischen Methode, die für die Unter- 

 suchung der qualitativen Verhältnisse der Kohlenhydratspaltung gute Dienste 

 leistet. Als Nährboden für die Versuche verwendet Beijerinck folgende Gelatine: 



') Wi/smann, De diastaso heschouwed als mongsel van Maltase en Dextrinase. 

 Amsterdam 1889. 



-) Beijerinck, Über Nachweis und Verbreitung der Glukase, das Enzym der Mal- 

 tose. Zentraibl. f. Bakt. II. Abt. Bd. 1. 8.221 (1895). 



