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Hacillus tetani Nicolai«'!-. 



Als Ilauptfundstelle für diesen lijizillus kann (iartenerde und <,'e- 

 diin^tes Ackerland hielten. Die Isolierung' aus den genannten Proben 

 jroschicht am besten unter Kinsflialtunj:- eines Tierversuches, zu dem 

 Kaninchen oder Meerschweinchen verwendet werden. Am rasierten Kücken 

 (auch Bauch) des betreffenden Tieres hebt man eine Hautfalte auf und 

 schneidet sie mit der Schere ein. Dann macht man mit einem Spatel 

 oder Glasstab eine Hauttasche, in die man einige (iramm Erde einfüllt 

 und hierauf durch eine Naht verschlieft. Schon nach 1 — 2 Tagen zeigen 

 sich bei gelungener Infektion die ersten Tetanussymptome an den in der 

 Nähe der Impfstelle gelegenen Muskeln, die starr werden. Sofort nach 

 dem Tode des Versuchstieres eröffnet man den Eiterherd an der Impf- 

 stelle und streicht mit der Platinöse davon etwas auf schräg erstarrtem 

 Nähragar aus, entsprechend dem Verfahren von Kitasato. ') Die beschickten 

 Röhrchen werden bei 87" C 1—2 Tage gehalten. Diese Mischkulturen 

 werden nun V* — 1 Stunde lang im Wasserbad auf 80° C erhitzt und nach- 

 her zu Gelatine- oder Agarplatten verarbeitet. Zu beachten ist, daß 

 die so von den vegetativen Bakterien gereinigten Tetanusbazillensporen 

 in einen sauerstofffreien Nährboden kommen. Zu dem Ende werden die 

 Oelatineröhrcheu im Dampftopf unmittelbar vor der Verimpfung durch 

 Va — 1 Stunde gekocht, dann auf 400 abgekühlt, verimpft und zu IMatten 

 rasch verarbeitet. Diese kommen in den auf S. 1244 beschriebenen 

 Zuchtapparat für Anaeroben. Am besten ist es, in der Wasser- 

 stoffatmosphäre zu züchten. Das Wachstum bei 22» C auf Gelatine ist 

 sehr langsam , denn erst nach ca. 5 — 6 Tagen sind die ersten kleinen 

 Kolonien zu sehen. Dieselben sind wenig durchscheinend, im Zentrum 

 dicht und von einem feinen Strahlenkranz umsäumt. Die Gelatine wird 

 langsam verflüssigt. \'on den Kolonien werden im hohen Agar Stich- 

 kulturen angelegt, die bei 87° C gehalten werden. Nach Kitasato eignet 

 sich zur Zucht besonders leicht alkalischer Nähragar mit einem Zusatz 

 von 2% Dextrose. Das gleiche gilt für Nährgelatine und Bouillon. 



Zur raschen Gewinnung von Sporen in größerer Menge züchtet man 

 den Bazillus in zuckerfreier Bouillon oder auf Blutserum (vgl. 

 Lingelsheim ^). Die Sporen sind sehr widerstandsfähig und halten sich, 

 vor Licht geschützt aufbewahrt, jahrelang im Laboratorium ent- 

 wicklungsfähig und virulent. Es empfiehlt sich, dieselben zur Aufbewah- 

 rung an Seidenfäden, sterilisierte Holzsplitter oder auf Filtrierpapier an- 

 zutrocknen. 



Zu Infektionsversuchen eignen sich von kleinen Versuch.s- 

 tieren die Maus, das Meerschweinchen und Kaninchen. Die Impfung 



^) S. Kitasato, Über den Tetanusbazillus. Zeitscbr. f . Hyg. und Infektionskrankh. 

 Bd. 7. S. 225 (1889). 



*) r. Linf/elsheim, Tetanus. Kolle und Wassermanns Haudb. d. pathog. Mikroorga- 

 nismen. Bd. 2. S. 567. Fischer, Jena (1903). 



