Die Technik der Gewebskultur in vitro. g39 



von oT" bis 39^0 entweder flüssig- oder fest. Leicis'^} benutzte einen 

 Kulturnährboden, der aus einer Lösung nach Locke aus Agar-Agar und 

 Bouillon bestand. Wir verwenden meistens Nährböden analoger Zusammen- 

 setzung, bei welcher ein Wachstum der embryonalen Gewebe vor sich geht. 

 Die Zusammensetzung ist folgende: 



Natrium Chlorid 0'9 



Calciumchlorid 0"024 



Kaliumchlorid 0'042 



Glukose 0-1 



Agar 3 



Destilliertes Wasser .... 100 

 Zuweilen fügen v,ir dieser Mischung noch 0*02 Natriumkarbonat oder 

 Natriumphosphat hinzu. 



Die Zusammensetzung der Nährböden kann in mannigfaltiger Weise 

 modifiziert werden, indem man die verschiedenen Salzmengen ändert. In 

 einem Nährboden, der nur aus Calciumchlorid , Natriumchlorid und Agar- 

 Agar besteht, entwickeln sich gewisse Embryogewebe, wenigstens während 

 einer kurzen Periode, sehr gut. 



Für die am meisten angewandten flüssigen Nährböden kommen fol- 

 gende Lösungen in Betracht: die Lösung nach Locke, oder die Binr/crsche 

 Lösung, eine Lösung von Natriumchlorid in destiUiertem Wasser oder 

 Serum, das aus dem Blut oder aus dem Plasma eines Tieres stammt, das 

 entweder derselben Art angehört, wie dasjenige, welches das Gewebe ge- 

 liefert hat; oder einer anderen Art. 



II. Präparieren der Gewebe. 



Die Gewebsfragmente, welche als Aussaat dienen, müssen mit sehr 

 großer Sorgfalt vorbereitet werden. Ihr Wachstum wird außerordenthch 

 beeinflußt durch die Art ihrer Abtrennung (Abschneidung), durch die Länge 

 der Periode, die sich seit dem Aufhören des Blutkreislaufes bis zum Be- 

 ginn der Kultur erstreckt, durch den Grad und die Dauer der Abkühlung usw. 

 Die Gewebe werden dem Tiere während des Lebens oder sofort nach dem 

 Tode exstirpiert. In den Kulturen von menschlichen Geschwülsten bringt 

 man das Gewebe so schnell als möglich nach der Exstirpation in den Kultur- 

 nährboden. Jedoch können die Gewebe, ehe sie kultiviert werden, auch 

 einige Zeit lang im Zustand des latenten Lebens erhalten werden. Die Leber 

 und die Hornhaut (Cornea) eines menschlichen Fötus, die 30 Stunden lang 

 im Eisschrank aufbewahrt wurden, ergaben noch ein schwaches Wachstum 

 der Zellen. ^^ ir bewahrten ferner Teilchen der Milz vom Hühnchenembryo 

 72 Stunden lang im Eisschrank auf und konnten beobachten, daß diese 

 Fragmente, in Plasma eingesät, so reichhch, wie frisches Gewebe, wuchsen. 

 Sicherlich konnte die latente Periode noch leicht verlängert werden. 



') Leids, The growth of embryonic chick tissues in artificial media, agar and 

 bouillon. Bull, of the .Johns Hopkins Hospital. 1911. p. 126. 



