Die Technik der Gewebskultur in vitro. g4]^ 



Bei den Uhrglaskultuieu füllt man die Höhlung mit Plasma und bringt 

 dann das Gewebsstückclien in die Mitte der Höhlung. Das Gewebe kann 

 nach allen Richtungen hin wachsen. Man kann Uhrglaskulturen eben- 

 falls in dünnen Schichten vornehmen. Das Uhrgias wird schließlich umge- 

 kippt und auf einem Objektträger befestigt. Bei den großen Platten- 

 kulturen breitet man das in sehr kleine Teilchen zerschnittene Gewebe oder 

 Organ auf einer breiten schwarzen Glasplatte aus, worauf man es gänzlich 

 mit Plasma bedeckt, das in möglichst dünner Schicht ausbreitet wird. Auf 

 diese Weise kann man auf einer einzigen Platte einen 15tägigen Hühnchen- 

 embryo, der in feine Stückchen zerhackt wurde, züchten. Der Objekt- 

 träger wird sofort in eine Glasschale für Kulturen gebracht, denn man muß 

 darauf achten, daß sich keine Luftstäubchen auf der Oberfläche des Prä- 

 parates absetzen. Das P'asma koaguliert rasch. Man neigt den Objektträger, 

 damit die Sekretionsprodukte der Kultur sich am Grunde der Schale an- 

 sammeln können. Dann stellt man unter den Objektträger mit Wasser 

 durchtränkte Watte, damit die Luft feucht gehalten wird. Hierauf wird 

 der Deckel aufgelegt und mit Paraffin befestigt. 



Die Bereitung der Kulturen in einem künstlichen, sich verfestigenden 

 Nährboden geschieht ungefähr in der oben beschiiebenen Weise. Während 

 des Präparierens des Gewebes wird der Kulturnährboden bei einer Tem- 

 peratur von 45" gehalten, damit er flüssig bleibt. Mitteist einer Pipette 

 bringt man Tropfen dieser Flüssigkeit auf Deckgläser und legt darauf die 

 Gewebsteilchen. Die Temperatur des Tropfens sinkt rasch und der Nähr- 

 boden wird gallertartig. Dann wird das Deckglas umgestülpt und an einem 

 Objektträger in der vorher erwähnten Weise befestigt. 



Bei der Darstellung der Kulturen in einem flüssigen Xähr1:)oden bedient 

 man sich einer sehr geringen Menge Flüssigkeit, die in einer dünnen 

 Schicht auf ein Deckglas aufgetragen wird. Es ist unbedingt nötig, daß 

 die Zellen an dem Deckglas festkleben. Deshalb darf das Gewebsstückchen 

 auch nicht in der Flüssigkeit schwimmen. Man kann diese Kulturen so be- 

 reiten, daß man ein sehr kleines Gewebsteilchen zuerst in die Lockesche 

 Lösung legt, später sehr sorgfältig mittelst einer Zange herausnimmt und 

 auf ein Deckgiä sehen bringt. Das Stückchen muß das Deckglas berühren, 

 das den Zellen als Stütze dienen soll. Die durch das Teilchen mitgerissene 

 Flüssigkeit wird in sehr dünner Schicht auf dem Deckglas ausgebreitet, 

 das dann auf einen gewöhnlichen Objektträger, von dessen Wandung es 

 durch eine Vaselinschicht getrennt ist, gelegt wird. Durch den gebildeten 

 sehr kleinen Hohlraum findet keine in Betracht kommende Verdunstung 

 der Flüssigkeit statt. Man kann sich auch eines sehr schw^ach ausgehöhlten 

 Objektträgers bedienen, der schließhch mittelst Paraffins verschlossen ^^'ird. 



IV. Aufbewahrung und Untersuchung der Kulturen. 



Die Kulturen werden in große, mit Gas geheizte Brutschränke auf 

 Etagen oder in Gruppen von zehn bis zwölf in Glasschalen aufbewahrt. 

 Da durch verschiedene Temperaturgrade die Schnelligkeit des Gewebs- 



