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trennung der Fermente anbetrifft , so hat die Buchnersche Preßsaftmethode 

 ihre Versprechungen nicht ganz gehalten, da bisweilen einzelne Fermente 

 nicht in den Saft übergehen, sondern im Preßkuchen zurückgehalten 

 werden, i) ]\Ian verwendet deshalb einfacher die feuchten Mikroorganismen 

 als solche, die man auf die lO^/oigen Zuckerlösungen in Gegenwart von 

 Toluol 48 Stunden bei Bruttemperatur einwirken läßt. Die von den Mikro- 

 organismen durch Filtration z. B. über Kieseiguhr befreite Lösung wird 

 mit lg kristallisiertem Natriumazetat pro 1^ verwandten Zucker versetzt, 

 auf dem Wasserbade erwärmt und nach Zusatz von wenig reiner Tier- 

 kohle filtriert. Durch diese Operation werden die Proteine zum größten 

 Teil entfernt. Dem klaren Filtrat wird auf ein Teil Zucker 2 Teile Phenyl- 

 hydrazinchlorhvdrat (das durch Umkristallisieren aus Alkohol reinweiß er- 

 halten wird) und o Teile kristallisiertes Natriumazetat zugegeben und im 

 Wasserbade, d. h. direkt im kochendem Wasser IV2 Stunden erhitzt. Nach 

 einstündigem Stehen in der Kälte werden die Osazone abgesaugt, mit 

 kaltem Wasser gewaschen und mit etwa 40 Teilen Wasser (auf den 

 Zucker berechnet) ausgekocht, kochend heiß filtriert und mit wenig heißem 

 Wasser gewaschen. Hierbei verbleiben auf dem Filter, wenn Spaltung ein- 

 getreten ist, bei Maltose und Zellobiose Glukosazon, bei Milchzucker und 

 Melibiose ein Gemisch von Glukosazon und Galaktosazon , endUch bei 

 Raffinose, je nach der Spaltung, die z.B. bei Schimmelpilzen in ver- 

 schiedener Richtung erfolgen kanuM, Glukosazon. Galaktosazon oder ein 

 Gemisch dieser beiden, wenn nämliche Spaltung in die drei Monosaccharide 

 eingetreten ist. Spaltung in Fruktose und Melibiose gibt sich hier dadurch 

 zu erkennen, das nach dem Auskochen der Osazone im Filtrat MeUbio- 

 sazon ausfällt. Außerdem werden die unlöslichen Osazone aus öO^oigem 

 Alkohol umkristallisiert und durch ihren Zersetzungspunkt geprüft, ob 

 Glukosazon oder Galaktosazon vorlag. 



Die in heißem Wasser unlöshchen Osazone kann man nach dem Trocknen 

 bei 100" zur Wägung bringen; ihre Menge ermöglicht eine annähernde Be- 

 urteilung des Grades der Spaltung. 



2. Der Grad des Abbaues. 



Quantitativ läßt sich die Spaltung mit einiger Leichtigkeit nur 

 beim nicht reduzierenden Rohrzucker verfolgen. -) Handelt es sich um die 

 Spaltung reduzierender Disaccharide in reduzierende Monosaccharide, so 

 muß man sich zur \'erfolgung des Spaltungsgrades durch die Reduktions- 

 kraft einer empirisch zusammengestellten Tabelle bedienen, da das Re- 

 duktionsvermösen durch die Anwesenheit verschiedener reduzierender 



') H. Pringsheim und G. Zemph'n, Studien über die Polysaccharide spaltenden 

 Fermente in Pilzpreßsäften. Zeitschr. f. physiol. Chemie. Bd. 62 (1909). S. 367. 



-) Vgl. Tollcns, Dieses Handbuch. Bd. H. S. 145. Genauere Angaben in E. r. Lipp- 

 mann, Chemie der Zuckerarten. Bd. I. S. 936. Braunschweig. Vieweg & Sohn. 1904. 



