Metliodik der Stoffwechscluutersuchung bei Mikroorganismen. 9g3 



Die zu analysierende Lösung (mit etwa 0"l (jr HNO3 in 80 — 100 cm^) 

 wird nach einem Zusatz von 10 Tropfen verdünnter Schwefelsäure nahe 

 zum Sieden erwärmt und mit 10 — 12 cm^ Xitronazetat-Lösung (10%ige 

 Lösung von Nitron in ö^/oiger Essigsäure) versetzt. 



Durch das Fällen aus heißer Lösung schießt das Nitrat in glänzen- 

 den Nadeln au und wird so in gut filtrierbarer und waschbarer Form er- 

 halten. Man läßt das Gefäß IV2 — 2 Stunden in Eiswasser stehen, 

 saugt den Niederschlag in einem Neubauer-Tiegel ab (vgl. Bd. I, S. 97), 

 indem man mit dem Filtrat nachspült und wäscht. Dann wäscht man, 

 nachdem die Flüssigkeit gut abgesaugt ist, mit 10 — 12 cm^ Eiswasser 

 nach. Das Waschwasser wird in kleinen Portionen aufgegossen, wobei 

 man jedesmal wartet, bis die Flüssigkeit durchgesaugt ist. Der Nieder- 

 schlag wird bei 110'' getrocknet, Mobei man in ^/^ Stunden Gewichtskon- 

 stanz erreicht. 



Die Berechnung erfolgt nach der Formel Cg,, HicN^.HNOg, das heißt 



63 

 das gefundene Gewicht an Nitronnitrat G . .-,^. ergibt die Menge der vor- 



0/0 



handenen Salpetersäure. Das hohe Molekulargewicht des Nitronnitrats be- 

 dingt natürhch einen besonderen ^^orteil der Methode, da sich etwa vor- 

 kommende Differenzen beim Umrechnen auf Salpetersäure auf ^/g re- 

 duzieren. 



Salpetersäure und salpetrige Säure nebeneinander. Das 

 Prinzip der Methode beruht darauf, daß man in einem Teil der zu unter- 

 suchenden Flüssigkeit die salpetrige Säure zerstört und die Salpetersäure 

 allein bestimmt und daß man in einem anderen Teil die salpetrige Säure 

 zu Salpetersäure oxydiert und beide gemeinsam als Salpetersäure be- 

 stimmt. Aus der Differenz der gefundenen Werte kann man den Gehalt 

 beider Säuren leicht berechnen. 



a) Zerstörung der salpetrigen Säure. Die eventuell durch Ein- 

 dampfen konzentrierte Lösung (z. B. 0'2 g der Salze von Salpeter + sal- 

 petriger Säure in 5 — 6 cm^ Wasser) läßt man langsam in einem Becher- 

 glase auf fein pulverisiertes und mit Wasser angefeuchtetes Hydrazin- 

 sulfat tropfen (auf 01^ NaNOs z.B. ^j^g HydrazinsuLfat) , wobei man 

 das Bechergias in Bewegung hält und mit Leitungswasser kühlt. Nach 

 Beendigung der Stickstoffentwicklung wird auf ca. 100 cm^ gebracht und 

 Avie vorher angegeben mit Nitron gefällt. Resultat: Salpetersäure allein. 



h) Oxydation der salpetrigen Säure zu Salpetersäure. bOcm^ 

 der Lösung (von einem Gehalt von 0*1 — 0"1 g Nitrit) werden mit 20 cm^ 

 einer o^/oig^n neutralen Lösung von Wasserstoffsuperoxyd versetzt mid 

 nur auf 70" erwärmt. Alsdann läßt man mittelst Tropftrichters 20 cm^ 

 reine 20/oige Schwefelsäure am Boden des Gefäßes einlaufen, wobei übrigens 

 nicht einmal besondere Vorsicht erforderhch ist, erhitzt nahezu zum Sieden 

 und fällt mit 12 cm'^ Nitronazetatlösung. Resultat: Salpetersäure plus zu 

 Salpetersäure oxydierte salpetrige Säure. 



