Methodik der Stoffwochseluntersucluing bei Mikroorganismen. 987 



ZU isolieren, muß man daher eine Prüfung auf chemischem Wege vor- 

 nehmen. Man prüft auf Ammoniak mit dem Nesslerschen Reagenz, auf 

 Nitrit mit dem Tromnisdorß'schen (Zinkjodidstärkelösung) und auf Nitrit 

 und Nitrat mit Diphenylamin- Schwefelsäure. Am besten verwendet man 

 für die Tüpfelreaktionen Porzellanplatten mit schalenartigen Vertiefungen. 

 In jede Vertiefung gießt man 1—I'^i2cm^ des Reagens mit je ein paar 

 Tropfen verdünnter Schwefelsäure. Bringt man dazu je eine Platinöse Kultur- 

 flüssigkeit, so breitet sich etwa am 4. Tage im Trommsdorß sehen Reagens 

 von der Berührungsstelle aus ein blauer Schleier aus. Die Intensität der 

 Reaktion nimmt in den nächsten Tagen zu, bis an der Berührungsstelle 

 ein gesättigter dunkelblauer Fleck entsteht, der sich über die ganze Ober- 

 fläche ausbreitet. Man beginnt dann mit dem Xesslerschen Reagens in 

 derselben Weise, das zu dieser Zeit noch einen deuthch gelben Fleck gibt, 

 der allmählich heUer wird und schließlich verschwindet. Ehe dieser Punkt 

 erreicht ist, ist natürlich die Zeit zum Überimpfen für die Nitritbildner 

 gekommen, denn jetzt wird die Diphenylaminreaktion positiv, auch wenn 

 man etwa vorhandenes Nitrit durch Kochen mit Harnstoff in saurer Lö- 

 sung zerstört hat, denn die Nitritbildner sind in Erscheinung getreten. Diese 

 kaim man sich auf einfachere Weise dadurch anhäufen, daß man das Ammon- 

 sulfat von vornherein durch ein pro Mill. salpetrigsaures Natrium ersetzt, 

 wobei schon nach zwei Umimpfungen alle ammonoxydierenden Organismen 

 aus der Kultur verschwunden sind. Bezüglich der Morphologie der Bak- 

 terien vgl. man die Winogrndski/sche x\bhandlung, die ausgezeichnete Photo- 

 gramme enthält. 



Reinkultur. 



Nitritbildner: Die Plattenkultur gelingt weder auf Gelatine noch 

 auf gewöhnlichem Agar, weil der Gehalt an Kohlenstoffsubstanzen hindernd 

 wirkt. Man verwendet Kieselsäuregallerte. 



Zur Bereitung der löslichen Kieselsäure mischt man gleiche 

 Raumteile Wasserglas (vom spez. Gew. 105 — 1"06) und Salzsäure (spez. 

 Gew. 1"10), indem man die Wasserglaslösung in die Salzsäure eingießt. Ob 

 Kali- oder Natronwasserglas verwendet wird, ist gleichgültig, nur muß es 

 farblos und klar sein, sonst bekommt man keine haltbare Kieselsäurelösung 

 nach dem Dialysieren. Die Dialyse wird in Pergamentpapierschläuchen 

 vorgenommen, deren Zustand vorher genau auf Durchlochungen zu prüfen 

 ist: man klemmt das eine Ende des Schlauches mit einer Schraubenklemme 

 fest, füllt den Schlauch mit Wasser und hängt ihn in vertikaler Richtung 

 auf. Nur solche Schläuche sind taughch, die an der Oberfläche keine Spur 

 einer Durchsickerung von Wasser merken lassen. Schnelle Dialyse ist für 

 die Haltbarkeit der Gallerte wichtig, weshalb man nur kleine Mengen auf ein- 

 mal dialysiert. Gewöhnlich genügt es, einen Tag lang gegen schnell fließen- 

 des Leitungswasser und einen Tag gegen 3 — 4mal gewechseltes destilliertes 

 Wasser zu dialysieren. Die Dialyse ist fertig, wenn man mit Silbernitrat 

 höchstens ganz geringe Trübung erhält. Die Lösung ist in sorgfältig ge- 



