988 Hans Priugsheim. 



waschenen Flaschen mit eingeschliffenem Stopfen aufzubewahren. Wenn 

 man richtig verfährt, so erhält man eine vollständig klare Lösung, ohne 

 die geringste Opaleszenz, welche ungefähr 2''/o Kieselsäure enthält, etwa 

 3 Monate haltbar ist und ganz gut das Sterihsieren bei 115 — 120" C verträgt. 

 Um daraus einen festen Nährboden für den Nitritbildner zu bereiten, 

 bedient man sich folgender Flüssigkeiten: 



1. Ammonsulfat 3 g. 

 Kaliumphosphat 1 g. 

 Magnesiumsulfat 0"5 g. 

 Destilliertes Wasser 100 g, 



2. Ferrosulfat 27oige Lösung. 



3. Gesättigte Kochsalzlösung. 



4. Magnesiamilch, d. h. eine Aufschwemmung von gut durchsiebter 

 kohlensaurer Magnesia. 



50 cm 3 der Kieselsäurelösnng werden in einem Kölbchen mii 2' b cm 

 der ersten und 1 cm^ der zweiten Lösung versetzt. V^on der dritten wird 

 nur ein Tropfen ganz zuletzt in jede fertig gegossene Platte gebracht. 

 Magnesiamilch setzt man so viel hinzu, daß das Gemisch ein milchiges 

 Aussehen bekommt. Gleichzeitig mit den Salzen impft man eine Öse voll 

 einer guten, nach viermahger Umzüchtung erhaltenen Kultur ein, welche 

 den Nitritbildner vorwiegend im Zustande freier Zellen und nicht von 

 Zooglöen enthält. Das kann man an einer Trübung der Anhäufungskulturen 

 beobachten. 



Beim Gebrauch der Platten gibt die Gallerte manchmal allmählich 

 Wasser ab. Darum stellt man die Schalen anfangs umgekehrt im Thermo- 

 staten auf und entfernt das sich im Deckel ansammelnde Wasser mit 

 sterilem Filtrierpapier. 



Es lohnt sich nicht, die Platten früher nach den Kolonien des 

 Nitritbildners zu darchsiichen, als sie eine starke Nitritreaktion geben. 

 Erst dann, wenn ein aus der Platte herausgeschnittenes kleinstes Stück 

 Gallerte, in Jodstärke oder Diphenvlamin eingetragen, ganz dunkelblau 

 wird, hat man die Sicherheit, daß die Platte schon Kolonien, wenn auch 

 mikroskopisch kleine, trägt. Die Nitritreaktion tritt am 5.-6. Tage auf 

 und erreicht am 10. — 12. die Höchststärke. Zuerst treten dunkle aus Zoo- 

 glöen bestehende Kolonien auf, die sich allmähhch in weiße der Einzel- 

 zellen verwandeln. 



Da die Kolonien immer sehr klein bleiben, so muß man noch einen 

 besonderen Kunstgriff gebrauchen, um ein mehr augenfälliges Wachstum 

 zu erreichen und so die Abimpfung zu erleichtern. Das wird durch wieder- 

 holte Ammongaben erreicht; an zwei einander diametral gegenüberliegen- 

 den Stellen der Schale werden aus der Gallerteschicht kleine Segmente 

 herausgeschnitten und in die so gebildeten Vertiefungen werden, so oft es 

 nötig ist, ein paar Tropfen einer lOVoigen Ammonsulfatlösung hineinge- 

 bracht, wobei man vor jedem Zusatz die angesammelte überschüssige 

 Flüssigkeit aus den Vertiefungen mit einem sterilen Papierstreifen entfernt. 



